化学发光免疫分析仪范文第1篇

本文阐述在ARCHITECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪应用实践中进行使用方法的改良，极大地方便了仪器操作者的使用，有效地避免了使用过程中的差错的发生。解决故障的过程有助于思路的扩展，对使用其他的检验仪器有很好的启发作用和较大的参考或应用价值。

关键词：全自动化学发光免疫分析仪；标本容易加错现象；标本识别移位故障；改良方案

【中图分类号】

R249 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）07-0272-01

Architect i2000SR全自动免疫分析仪是由美国雅培公司研发的第三代大型全自动免疫分析仪，采用化学发光的原理进行检测，具有较高的灵敏度、特异性和稳定性，具有检测速度快，测量范围宽广等诸多优点，且可与生化模块C8000相连。且检测试剂稳定并易于进行室内与室间质量控制。然而全自动化仪器的高故障率亦对检验技术人员提出了更高标准的要求。本文即是作者在雅培i2000SR全自动化学发光免疫分析仪应用实践中遇到的：容易出现加错标本，和机器本身出现标本识别移位的故障现象，分析其原因、探讨改造方案并付诸实践成功解决故障的过程，以便应用到其他的现代化的检验设备使用中去。

1 标本容易加错的改良方案

1.1 标本容易加错的现象：

由于该机器的原来的设计是每个标本架只有5个孔，也就是每个标本架只能放置5个标本，这样就使使用者放置标本时，必须要好好的记着所加标本的原来的编号，待放到架子上时要好好的计算出标本的位置是在第几个架子、第几号位置编号。譬如：手里拿着16号标本需要放置到标本架子上时，就必须计算出是第4个架子的第1号位置才是16号的位置。是非常的不方便吧？

1.2 标本容易加错现象的解决方案：

因为我发现了这个非常不容易计算出所要加的标本位置，并且又很容易加错标本，工作起来非常不方便的现象时，就一直在脑子里寻求一个解决这个问题的方案。

不久我就想出来了个解决的办法：那就是在每个标本架的靠近1号位置端，设计出了一个不干胶贴，上端标明1、2、3、4……架子号顺序号，下端标明该架子的5个标本号在该架子上的应有的顺序范围。详见附图1改造后的第一个托盘俯视图

2 标本识别移位故障的改良方案

2.1 故障现象：

应用ARCHITECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪进行批量编程，每个标本架放置5个标本，每5个标本架为一组，每一组用一个托盘托起，即标本号依次为1-25、26-50、51-75、76-100四组。在全部标本仪器检测完成后，对HBsAg阳性标本利用金标法复查时，偶然发现阴阳性结果极为不符合的现象。遂对每个标本对应的架号、位置、结果逐一排查，发现个别标本架上的标本并没有消耗（即没有被取样），但却赋上了数值。经逐一检查仪器所加样本与操作者编程的标本架号位置明显不同，即发生了跳跃，如31号标本所赋值实为36号样本测试值或其它样本值。

2.2 故障分析：

经与使用ARCHITECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪的兄弟单位工作人员及雅培中国工程师沟通，了解其工作过程原理是：利用ARCHITECTi2000SR化学发光免疫分析仪批量编程1-25、26-50、51-75、76-100号标本架号位置后，仪器会首先会进行标本架条码扫描，同时也给每个标本进行扫描。如果某个标本架的条码没有扫描到，则机器会自动顺延一个标本架进行操作，这样就会出现跳架移位现象，也就是我们上述的故障现象。譬如仪器在批量编程，31-35号标本架的条码扫描过程中没有扫到，仪器则默认该架子不存在，标本也不存在，跳过了该标本架，将36-40号标本架或及其它标本架上的标本默认为31-35号标本。以后的标本均以同样的方法顺延赋值，即后面的所有标本均顺延了5个号码，如不复查而直接报告传输的结果，必然出现张冠李戴的严重后果。上述现象并非偶然，随着工作量的增加，出现的频率越来越高，为日常检验工作带来相当大的不便，工作人员往往会花费很大的时间和精力，去排查或复查标本与结果是否相符，一度认为此仪器的标本识别和处理软件系统存在巨大缺陷。

3 标本识别移位故障的解决方案

通过细致的观察分析、严密的科学探讨和积极的创新实践，我们对ARCHIT -ECT i2000SR全自动化学发光免疫分析仪的进样系统，进行了简单而合理的改良，使上述故障得以完全解决。具体方法如下：

准备100个改造过的与架同高的平口空试管（以合适放置加样杯为宜），利用条码机打印1-100编号号码的条码，分别贴在每个试管上条码器能够扫描到的位置。将这些贴有条码的试管按顺序放置在标本架上，并保持条码向外，易于条码系统识别判读；实验操作时只需将加样杯放置在对应贴有条码的试管上即可。请注意：只需更换加样杯加病人血清标本。更多的标本亦可用类似方法粘贴上1-100或更多的试管条码。

详见附图1 图2所改造的H540试管架俯视图和侧视图

经过如此改良，仪器在进行标本架条码扫描时，同时也会给每个试管条码进行扫描，如果其中某个标本架条码漏扫，但仍会扫描到试管上的条码号，机器则自动的默认标本架的存在，就不会出现跳架移位的现象。

4 思路扩展与推广应用

标本容易加错的解决方案：就是以较小的改造或改良，而改变了原来的设计的不足，避免了工作中容易出现的错误。像这种小的改造可以用到大多数的试管架子是5个试管位置的大型生化分析仪、放免分析仪等的仪器上。

标本识别移位故障的解决方案：类似的跳架移位故障，不仅出现在ARCHIT -ECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪上，在其它设备上，譬如ARCHITEC -Ti4000SR等仪器亦会出现，亦可采用此法进行改造或改良。兄弟单位同类仪器或不同品牌的仪器，出现类似的因为批编程而出现的跳架移位故障亦可借鉴此方法一试，以避免出现数据移位错误，为临床提供准确的检验信息。

化学发光免疫分析仪范文第2篇

关键词：免疫检验；自动化分析；研究

现行临床免疫检验应用较多，特别是在肿瘤的发生、发展、复发及存活期期间，多依靠免疫检验帮助临床判断患者的当下情况，并未患者的治疗提供帮助。而在免疫检验自动化的发展过程中，也经历了诸多的变化，随着医疗设备的不断发展，免疫检验自动化也得到了巨大的进步，经过多年的研究，免疫检验自动化分析的操作步骤也在逐渐减少，检查报告结果更加准确详细，免疫检验已经从微量检测进一步发展为超微量检测[1]。而对免疫检验自动化进展总结分析，也具有较强的现实指导意义。

1免疫检验自动化的概念以及现状

1.1 临床免疫检验自动化的概念 免疫自动化检验指的是计算机控制检测仪器进行免疫检测分析，不需要人工操作。主要涉及三方面的工作：①加样品、分配试剂、以及洗涤和检测的自动化。②检测数据的自动化处理。③提示操作人员仪器出现故障以及解决办法[2]。

1.2现状分析 今年来临床免疫检验的工作量逐步增大，传染性疾病对检验人员的构成的风险不断加大，对检验工作的效率也提出了很高的要求，因此临床上免疫检验的自动化要求已经刻不容缓。自动生化分析技术在七十年代应用于临床检验实验室，经过二十年的发展，至九十年代免疫检验分析技术已经发展的越来越成熟，其中时间分辨荧光检测技术、化学发光检测技术等先进的分析技术不断的应用于临床免疫检验，这些检验技术灵敏度高、特异性好，抗干扰能力较强。

随着临床检验技术的不断发展，极大的促进了免疫检验技术的自动化的发展，很多自动化的分析仪应用于临床，大大降低了检验人员的工作强度，缩短了分析的流程，提高了检验结果的特异性以及准确性和灵敏度，所以自动化检验备受临床医学检验人员的青睐。

2临床免疫检验自动化的发展

2.1标记免疫检验技术的自动化发展 标记免疫指的是采用酶、放射性同位素等物质标记抗原或者抗体发生抗体、抗原反应。已经广泛应用于临床。由于其标记方法不尽相同，主要可以分为：放射免疫技术、酶标记技术、免疫荧光标记技术。其中临床检验中使用最广泛的是放射免疫技术和免疫荧光标记技术。但是两者都有明显的缺点，免疫荧光标记技术比较费时而且不能进行定量和自动化，放射免疫技术检测所需仪器复杂且价格昂贵，对人体危害比较大。酶标记技术则是一项易于操作的一项新技术，具有无需特殊设备、适用范围广泛、检测周期短等优点。

免疫标记检测技术主要具有两方面的优点：灵敏度高，测定目标由待测物转变为待测物上的微量标记物质，利用其放大效应，大大降低了待测物的检测下限，可进一步发展到超微量检测。特异性高，从传统的有机或者无机试剂发展为抗体和抗原，使得检测的特异性显著提高，随着酶试剂、稀土元素等更加灵敏、高效的标记物质的出现，免疫标记检测技术发展迅速，已经成为了临床免疫检验检测各种激素、肝炎抗体、肿瘤标记物等微量蛋白物质的主要检测分析手段[3]。

2.2 免疫浊度检测的发展

2.2.1 透射浊度检测法 免疫浊度的测定可以通过检测光源光路方向透射光的强度，分析其与测定溶液溶度的关系的方法。透射光的吸光度与待测定免疫物质的量呈现正相关，抗体量固定时，根据待测定免疫物质的吸光度，计算出相应抗原的量，这种方法的优点是只要试剂合适，在普通的生化分析仪上就可以进行全自动化的分析，可以使得人体液中的特异性蛋白质测定的准确度和灵敏度显著提高，检验流程更加简洁。

2.2.2散射浊度检测法 散射浊度检测法指的是波长一定的光照射溶液，当遇到抗原抗体复合物分子时，复合物颗粒导致光线折射，出现偏转，其偏转角度与光线波长以及复合物分子的大小和量有很大关系。光强度与抗原抗体复合物含量成正比，散射光强越强，那么形成的抗原抗体复合物也就越多。这种方法的优点是检测范围宽、检测速度快、敏感度高，但是要求所检测的抗体质量比较高。

3免疫检验自动化的总结

免疫检验自动化的主要技术参数主要有：临床检验中的抗体、抗原需具有高度的特异性和亲和力；检验中的固体载体一般为磁性微球，以达到增加免疫反应的面积的目的；自动化分析仪都要结合相关的计算机软件对测定的数据进行转化和分析。新的分析仪设计智能化程度不断提高，其自动化程度不断发展，已经成为了新时期临床免疫检验的最重要的检验方法之一。在不断的临床实践过程中，对临床免疫检验自动化的发展进行深入的研究。随着科学技术的不断进步，一些高灵敏度、高精确度的免疫检验技术将会广泛应用于临床，提高临床免疫学检验的效率，促使检验技术不断向着更高质量的方法发展。

参考文献：

[1]石云，罗萍，郭刚，等.创新性设计性实验在免疫学检验实验教学中的应用[J].现代医药卫生，2010，17（22）：41-42.

化学发光免疫分析仪范文第3篇

1生物分析原理

将悬浮分散的单细胞悬液，经特异荧光染料染色后，放入样品管，在气体压力的作用下，悬浮在样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流动室，沿流动室的轴心向下流动，流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动，形成包绕细胞悬液的鞘液流，鞘液和样品在喷嘴附近组成一个圆柱流束自喷嘴的圆形孔喷出，于水平方向的激光束垂直相交，相交点成为测量区。染色的细胞经激光照射后发出荧光，同时产生光散射。这些信号分别被呈90℃角方向放置的光电倍增管荧光检测器和向前角放置的光电二级管散射光检测器接收，经转换器转换或电子信号后，经模/数转换输入计算机，计算机通过相应的软件储存，计算，分析这些数字化信息，就可得到细胞的大小活性，核酸含量，酶和抗原的性质学物理和生化指标。

2细胞分选原理

在压电晶体上加上频率为30kH2的信号，使之产生同频率的机械振动，流动室也就随之振动，于是通过测量区的液柱断裂成一连串均匀的液滴。由于各类细胞的特性信息在细胞形成或液滴以前在测量区已被测定，并储存在计算机中，因此当某类细胞特性与要分选的细胞相同时，流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以标定的电荷，而不符合分选条件含细胞悬液滴及不含细胞的空白液滴不被充以特定电荷。带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时，依所带电荷的符号分别向左偏转和向右偏转。落入指定的搜集器内，不带电的液滴不发生偏转，垂直落入废液槽中被排出，从而达到细胞分类，收集的目的。

3主要性能指标

荧光测量的灵敏度：流式细胞技术均可检测到

分辨率：分辨率是衡量仪器测量精度的指标，通常用变异系数CV表示，流式细胞仪最佳状态CV

流式细胞仪的分选速度为：3000个/s～6000个/s。大型仪器可达每秒几万个细胞。

4流式细胞技术的临床应用与分析

流式细胞仪是今年来发展起来的现代细胞学分析技术中的常用仪器。它具备快速，准确量，化学特性。目前已广泛应用于免疫学，细胞生物学，血液学，肿瘤学，病理学，遗传学，临床经验学多领域。

4.1FCM在免疫学中的应用

流式细胞术是在细胞分析和分选的基础上发展起来的一种新的细胞参数计量技术。它以其快速灵活和定量的特点，广泛应用于免疫学理论研究和临床实践：有现代免疫技术基石之一之称。尤其同单克隆抗体的结合应用，在淋巴细胞及其亚群分析，淋巴细胞功能分析，免疫分型，分选，肿瘤细胞的免疫检测，机体免疫状态的监测，免疫细胞系统发生及特性研究等方面都起着相对重要作用。

4.2在血液学中的应用

血液病多为肿瘤性，免疫性和遗传性疾病，恶性血液病约占总数的一半以上，流式细胞仪（FCM）在血液病及淋巴瘤的发病机制，诊断治疗和预后判断学方面都具有重要价值。

白血病患者的异常细胞在分化过程中受外因，内因或突变等因素的影响曾克隆性异常增殖。白血病的免疫分型是选择化疗方案和判断预后的重要依据。FCM结合单克隆抗体的应用对白血病经行免疫分型。可以提高白血病分型诊断的符合率。可为指导治疗和判断预防提供帮助。

4.3流式细胞技术在细胞生物学中的应用

流式细胞技术在细胞生物领域内的应用，是流式细胞仪在基础研究中应用范围最广的领域。目前细胞生物学研究中，应用最频繁也是最普通的是细胞周期分析，包括细胞周期个时期的百分比和细胞周期动力学参数的测定内容。在方法学上除一般的化学染色方法外还有抗溴脱氧脲嘧啶核苷单克隆抗体技术，对同一细胞的参数测定技术则导致了对细胞周期的一些新发现，典型的方法是吖啶橙双染技术，这个技术不仅可以进行细胞周期分析，而且给细胞周期的研究带来了一些新的概念。流式细胞测量术和分选术在染色体，，和精细胞的研究及遗传学，分子遗传学也都有用武之地。

4.4流式细胞术在肿瘤学中的应用

流式细胞仪在肿瘤学研究方面已成为重要手段之一。近年来引起肿瘤研究者的极大关注。对于制定近年来荧光细胞化学技术的发展以及荧光探针标记单克隆抗体为流式细胞技术研究各种肿瘤抗原，肿瘤蛋白，致癌基因开辟了新途径，极大地提高了肿瘤研究水平，并为流式细胞技术在肿瘤学研究中开辟了更广阔的应用前景。

4.5流式细胞技术在AIDS病检测在的分析

流式细胞术用AIDS病免疫功能的检测的重要手段，采用参数荧光标记计数可对T淋巴细胞及亚群经行分析并通过动态监测T细胞亚群可以对HIV感染者或AIDS发病都进行区别。仅为HIV携带者，病毒未复制时，其Th细胞下降不明显。当发展为AIDS时Th细胞水平明显下降，如Th1细胞＜Th2细胞时，HIV在细胞间的传播和感染更敏感，易发生AIDS。同时，当HIV阳性而无症状的患者，其Tc对Tc激活剂不反应者，其体内CD+4Th细胞水平下降迅速。条件致病微生物感染率也同时增加，对Tc激活剂反应敏感者，可维持CD+4Th细胞水平降低较慢或不降低，减少发生AIDS的几率。

4.6流式细胞仪对自身免疫性疾病相关HLA抗原的分析

有些疾病的发病常与一些类型的HLA抗原检出有关，在这些疾病中，某些HLA抗原检出率比正常人群检出率高，最典型疾病是强直性脊柱炎，其外用HLA-B27表达及表达程度与疾病的发生有很高的相关性，利用FCM可以进行HLA-B27/HLA-B7双标记抗体检测HLA-B27阳性细胞，同时又排除交叉反应。通58%～97%的强直性脊柱炎患者可检出这种抗原，而正常人仅为2%～7%检出这种抗原。FCM检测HLA-B27快速，特异，敏感，为强直性脊柱炎的临床诊断提供了有力帮助。

总之，流式细胞技术在血液学，肿瘤，细胞生物学和自身免疫性疾病临床诊断治疗中具有广泛的应用价值。

化学发光免疫分析仪范文第4篇

【关键词】 胃蛋白酶原； 检测方法； 敏感性； 特异性

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.048

血清中胃蛋白酶原（PG）的检测，作为胃癌筛查的血清学指标已广泛应用于临床［1］，其检测方法有多种。本文对临床较常见的检测4种检测方法进行了对比分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取健康体检者自愿进行胃镜检查，未发现胃部黏膜有任何异常者137例作为正常对照组，其中男90例，女47例，平均年龄（48.73±10.58）岁。选取在本院经胃镜及病理检查确诊的未经过任何治疗的胃癌患者98例，其中男68例，女30例，平均年龄（56.97±7.84）岁。

1.2 方法 受试者采集空腹静脉血3 ml，分离血清后，-20 ℃保存。检测前1 h血清复融，并离心取上清液检测。放射免疫分析法（RIA）法试剂盒由江苏原子医学研究所提供。仪器采用西安XH-6020放射免疫r计数仪。时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）法试剂盒由江苏原子医学研究所提供。仪器采用PE公司Auto DELFIA1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪，乳胶增强免疫比浊法剂盒由北京九强公司提供。仪器采用奥林巴斯AU-2700全自动生化分析仪。酶联免疫法（ELISA）法试剂盒由芬兰BIOHIT公司提供。仪器采用深圳爱康Uranus AE-180全自动酶免疫分析仪。以上4种检测方法，按照试剂及仪器操作说明进行操作，结果严格按照试剂说明书进行结果判读，并按如下公式计算各种检测方法的敏感性及特异性：敏感性=真阳性/（真阳性+假阴性），特异性=真阴性/（真阴性+假阳性）。

1.3 统计学处理 用SPSS 11.5统计软件对数据进行分析，两组间比较采用χ2检验，以P

2 结果

RIA法敏感性最高为74.49%，特异性最低为73.00%，另外3种检测方法敏感性和特异性与其比较均无统计学意义（P>0.05）。4种检测方法的检测结果及敏感性和特异性见表1。

通讯作者：杨瑞生

3 讨论

胃癌是常见的消化系统肿瘤，其死亡率位居恶性肿瘤的第二位［2］。长期以来，胃癌的诊断主要依靠胃镜及病理检查，缺乏相应的血清学检查方法。而胃镜检查不便作为常规的普查手段，故使得胃癌早期诊断率较低，而死亡率居高不下。因此，寻找一种方便快捷、灵敏可靠的胃癌早期筛查方法显得很有必要［3］。

PG是胃蛋白酶的前体，可分为PGⅠ、PGⅡ两个亚型,其血液中含量的变化可反映胃黏膜的分泌水平［4］。本研究显示，PG的4种常见检测方法中，以RIA法敏感性最高为74.49%，另外3种检测方法敏感性稍低，但与RIA法相比均无统计学意义（P>0.05）。特异性与敏感性呈负相关，敏感性越高，其特异性越低，但4种方法相比较亦无统计学意义（P>0.05）。

由于PG的检测不是胃癌的确诊方法，只适用于大面积人群的早期筛查［4］，因此，检测方法的敏感性就显得较特异性更为重要。临床要选择敏感性相对较高、操作简便、成本较低的检测方法，对发现的阳性病例，及时进行胃镜及病理检查确诊，即可达到早发现、早治疗、提高患者生存时间的目的。

RIA法虽然敏感性较高，但试剂具有放射性，可造成环境污染，且有效期短、不易保存，应用受到一定限制［5］，可不作为首选。乳胶增强免疫比浊法是近年来应用于临床的PG检测方法，可以用全自动生化分析仪进行检测，其操作简单，短时间内可完成大批量的检测，因此，有全自动生化分析仪的医院可作为首选［6］。TRFIA法敏感性居4种检测方法的第二位，但其试剂成本较高，且需要昂贵的仪器，故有条件的医院可选用此法。ELISA法试剂成本低廉，不需要昂贵的仪器，但其敏感性相对偏低，且只能定性或半定量检测，不能动态观察PG的变化，可作为基层医院的首选。

参 考 文 献

［1］ 尹惠卿,黄凯达,段昱,等.胃癌患者血清肿瘤标志物变化及其临床价值分析［J］.中国误诊学杂志,2008,8(1):77.

［2］ 顾光大.血清胃蛋白酶原、胸苷激酶联合检测对胃癌的诊断意义［J］.实用医学杂志,2009,25(5):715-717.

［3］ 吴志成,陈娟,何敏,等.血清胃蛋白酶原对胃癌早期诊断的应用研究［J］.国际检验医学杂志,2010,31(8):786-787.

［4］ 马颖杰,王惠吉,鲍晓厉.血清胃蛋白酶原与胃溃疡及胃癌［J］.中国医刊,2008,43(12):46-48.

［5］ 王翌,蔡刚明,俞蕾,等.胃癌及溃疡患者血清胃蛋白酶原的测定分析［J］.齐齐哈尔医学院学报,2008,29(24):3008-3009.

化学发光免疫分析仪范文第5篇

【关键词】乙型肝炎 血清标志物 评价分析

中图分类号：R446.6 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）7-444-02

乙型肝炎（ 乙肝）是在感染了乙肝病毒（HBV）后，所引起的危害较为严重的病毒性肝炎。据调查显示，在我国人群中，有60%的人感染过乙型肝炎病毒，其中10%为乙型肝炎表面抗原（HbsAg）携带者，每年乙型肝炎的新发病人数约有50万，不仅严重影响了人们的健康，而且给社会、家庭造成经济负担。测定乙型肝炎病毒血清标志物已经在国内广泛开展，它不仅在检测稳定性和灵敏度大大提高，给临床上的诊断带来好处。近年来，时间分辨免疫荧光法( TRFI A )、酶联免疫吸附试验 ( ELISA)、电化学发光法 ( ECLI A)和化学发光法( CL I A )等新方法也在逐渐地被临床实验室接受。为了解不同方法学检测结果之间的一致性，我们使用上述4 种方法来进行检测， 并对其一致性程度进行了评价分析。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取经罗氏 ECLIA证实的 98例乙型肝炎病毒( HBV)感染者及 46例体检者的血清，其中男性89人，女性55人。时间分辨免疫荧光法检测使用了芬兰的w allacDELFI A-1235分析仪及上海新波的生物试剂盒；酶联免疫吸附试验检测使用了意大利的 ALI SE I全自动酶标仪及上海科华的生物试剂盒；电化学发光法检测使用了德国罗氏E601电化学发光免疫分析仪及与其配套的试剂；化学发光法检测使用意大利的L I ASON化学发光免疫分析仪及与其配套的试剂。

1.2 检测方法：酶联免疫吸附试验操作按试剂盒的说明书进行，全自动仪器的操作按厂家说明书和科室仪器标准操作程序的规定进行检测。将所有样本分别用4种方法进行检测血清标志物，即乙肝表面抗原 ( HBsAg )、乙肝表面抗体 (抗 HBs)、 乙肝e抗原 ( HBeAg)、 乙肝e抗体 (抗 H Be)、 乙肝核心抗体 (抗 HBc)的检测。每次检测，均带有阴、阳性质控。

1.3 检测结果的判断：以厂家的试剂说明书所规定的Cut-off值来作为判断的标准。应用夹心法，检测结果 > Cut-off值，为阳性。

1.4 统计学处理：采用K appa检验，判断不同的检测方法结果是否有一致性，并进行u检验以排除抽样误差带来的影响。而一致性的强弱程度按Koch和Landis以K appa系数的大小划分为6个区段的方法进行判断：Kappa系数＜0 为极差； 0～ 0.2 为微弱； 0.21～0.4 为弱； 0. 41～0.6为中度； 0.61～0. 8 为高度； 0.81～1.0 为极强。

2 结果

2.1 ELISA与 ECLIA方法检测乙肝血清标志物的结果比较见表 1。

表 1

经统计学分析，在所有项目中， P < 0. 05， 此2种方法有一致性。

2.2 TRFIA与 ECLIA方法检测乙肝血清标志物的结果比较见表 2。

表 2

经统计学分析，在所有项目中， P < 0. 05，此2种方法有一致性。

2.3 CLIA 与 ECLIA 方法检测乙肝血清标志物的结果比较见表 3

表 3

经统计学分析，在所有项目中，P < 0. 05，此2种方法有一致性。

3 结论

采用不同的检测方法，对乙型肝炎疑似患者进行乙肝血清标志物（HbsAg、抗-HBs 、HbeAg、抗-Hbe和抗-HBc）检测，并进行统计学分析，为有效地预防控制乙型肝炎提供了科学的依据。

4 讨论

乙型肝炎病毒血清学标志物的变化是评估乙型肝炎病毒感染后的病情转归重要依据， 也是抗考核病毒治疗疗效的指标之一[1]。据报道，在部分H BsAg 和抗- H Be 阳性的慢性活动性肝炎、肝癌和肝硬化患者中，抗- HBe阳性不能说明病毒复制程度已经减低，也不代表复制的停止，病变仍然有可能发展。[2]

检测乙肝血清标志物的多种方法中，既有定性的金标法和酶联免疫吸附试验，又有定量的时间分辨免疫荧光法、化学发光法、电化学发光法等。这些方法由于所采用的单位和溯源性不同，其结果差异极大，给临床医生与患者正确解读检测报告和将检测结果用于诊疗带来了很大困难。在医疗改革的背景下，检验也正面临着实验室结果的互认问题，对不同的方法学所检测出来的结果进行相关性评价，这是结果互认的前提。对定量项目的方法学比对，通常采用回归性分析，对定性项目的检测结果，应用K appa检验进行判断不同方法的一致程度[3]。本组所采用了4种常见的检测乙肝血清标志物方法，其中电化学发光法是当前特异性和敏感性最好的检测方法，作为参考方法，而其他方法学的结果和电化学发光法的结果进行比对，来探讨不同的方法学的应用价值。

从结果上分析，目前采用最广泛的酶联免疫吸附试验和电化学发光法在HBeAg项目上表现出极强的一致性，其余的4项表现为高度的一致性，这说明了尽管酶联免疫吸附试验在应用多年，并且试剂在不断改进后仍然可以满足目前一般的临床检测需要[4]。但也可以看到，酶联免疫吸附试验在敏感性方面还有不足，在判断结果的时候还会受检测的灰区所影响，使部分结果误读，在血站和手术等情况不适合使用。但酶联免疫吸附试验也有很多优点，即试剂的成本低、收费低，有利于降低医疗上的费用，适于普通人群筛查与对医疗费用要求较为敏感的患者。从结果上还可以看出，使用时间分辨免疫荧光法与电化学发光法检测结果在HbeAg、HBs Ag、抗 HB c、抗 Hbe这 4项上有极强的一致性，在抗HBs上有高度的一致性，和文献报道基本一致[5]。但在检测正常人的HBs A g时，出现4例不一致，这反映出方法学的特异性差异。由于时间分辨免疫荧光法试剂已实现国产化，所以在缺少全自动化学发光仪和需要定量检测结果时，可以使用此方法代替应用进口试剂和仪器的化学发光法。

本组研究结果显示，电化学发光法和化学发光法的检测结果在HBs Ag、HbeAg、抗 Hbe、抗 HB s 这4项上有极强的一致性，在抗HBc上有高度的一致性。由于此2种方法目前均应用进口试剂，这些试剂常常溯源至国际标准，具有可比性，而无法溯源的项目 (例如抗 HBc)，一致性的程度稍差。因此，这2种方法学在临床上的常规检测中没有大的差异， 其差异主要表现为检测病毒变异的能力。对已经具备全自动化发光检测仪的实验室，使用此方法操作简便，可以获得较好的精密度和检测敏感性与特异性，不足之处在于仪器、试剂的成本昂贵，适于已经明确诊断的患者进行治疗后疗效判断或者在其他的方法学不能确定结果时检测。而对溯源一致的项目，则可以通过回归分析定量结果来评价其一致性的程度，而对处在病毒复制期和可能发生变异的患者，还应与HBV DNA与YMDD基因检测，进行相关性分析，便于明确方法学检测的临床价值。

参考文献

[1]卫国，王福生，陈菊梅.病毒载体动态检测在乙型肝炎治疗和研究的意义.中华肝脏病杂志， 2003，11 ( 1) ：54-56；

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