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在此,我们就对本教材在理论基础、学术发 展方面的认识和受到的启发作一叙述,与同道 交流,以进一步促进中医儿科学的教材建设和 教学改革提高教学质量,培养高素质人才,共 同为中医儿科学以及中医药事业的发展而努 力。
1 突出中医传统特色,中医理论基础坚实
教书育人,知识传承,重在培养学生的思维 能力,建立坚实的理论基础,发挥独立思考的能 力,增长灵活运用知识、技能的本领。为此,打 下良好的理论基础至关重要。在我们的本科教 育中,重视高素质的中医药人才培养已成为明 确的目标。本教材围绕这一目标和要求,十分 重视中医儿科学基础理论知识的传授,全面系 统、详实准确地介绍了中医儿科学基本理论,即 以中医基本理论为依据,以中医儿科学‘五脏证 治”体系为中心;以外感、乳食、情志、脏腑虚实 等论述小儿疾病的病因病机;四诊合参以望为 主诊查小儿疾病;以整体观念、辨证论治、审证 求因论疾治病;用四气五味、脏腑归经、制方选 药、内治外治处理各类儿科疾病。充分体现中 医思维方法,运用我国传统的诊治手段处理儿 科疾病,培养学生掌握和运用中医儿科学理论 及防病治病方法的能力。
例如:教材介绍小儿生理特点是脏腑娇嫩, 形气未充,即吴鞠通言:稚阳未充,稚阴未长”。 概括地说明了小儿处于生长发育时期,其机体 脏腑的形态未曾成熟各种生理功能未曾健全。 脏腑柔弱,对病邪侵袭、药物攻伐的抵抗和耐受 能力都较低。小儿的脏腑娇嫩,虽是指小儿五脏六腑的形与气皆属不足,但其中又以肺、脾、 肾三脏不足更为突出,因此,相对于小儿的生长 发育需求,经常会出现肺常不足、脾常不足、肾 常虚的特点。形气未充,又常常表现为五脏六 腑的功能状况不够稳定、未曾完善。如肺主气, 司呼吸,肺气未充,表现为呼吸不匀、息数较促, 容易感冒、咳喘;脾主运化,脾气未充,运化未 健,表现为食宜细软,饮食不知自节,易患积滞、 厌食、吐泻;肾藏精,主水,司二便,肾气未充,表 现为婴幼儿二便不能自控或自控能力较弱,且 青春期前女孩无月事、男孩无“精气溢泻”。同 样,心、肝二脏也未曾充盛,功能未健。心主神 明、血脉,小儿心气未充,表现为脉数易乱、易发 惊悸。肝主疏泄、主风,小儿肝气未充,经筋刚 柔未济,表现为好动,易发惊惕、抽风。小儿生 理的另一特点是生机蓬勃,发育迅速,即《颅囟 经》所谓“纯阳”学说。“纯”指小儿先天所禀的 元阴元阳未曾耗散;“阳”指小儿的生命活力犹 如旭日初升,草木方萌,蒸蒸日上,生机勃勃。 都是对传统中医儿科理论的准确阐释。
再如分析小儿疾病的病因特点为外感、乳 食、先天、情志因素。诊法运用望闻问切四诊合 参,但因小儿不能正确表述病情,故四诊之中, 尤重望诊,望其神色、形态、苗窍、斑疹、二便、指 纹等,结合听声音、嗅气味、察二便、问病情、按 切诊等等。在处治疾病的方法上更是以整体观 点为指导,充分运用辨证论治、审证求因的方 法,对于各系统疾病普遍运用脏腑辨证、八纲辨 证等辨证方法辨证论治。如肺系疾病之咳嗽、 哮喘、肺炎喘嗽等,脾系疾病之呕吐、腹痛、厌 食、积滞、疳证等,心肝病证之汗证、夜啼、注意 力缺陷多动症等,肾系疾病之尿频、遗尿、五迟、 五软等。对于以感受外邪为主要病因的外感性 疾病如麻疹、风疹、幼儿急疹、水痘、猩红热、乙 脑等则运用卫气营血辨证和八纲、脏腑辨证相 结合辨证论治。在治疗中运用内治、外治或内 外并治的方法,介绍了经过历代医家证明确有 疗效的治法方剂,尤其是大量采用了张仲景、钱 乙、吴鞠通的经典名方,又荟萃当代医家的临床 。
2 继承传统中医儿科学理论,创新认识优势病种
本教材始终坚持继承传统中医儿科学理 论,论生理特点之“稚阴稚阳”学说和“纯阳”学 说,论生长发育之“变蒸学说”等;诊断之察指 纹、面部五色主病等;辨证之八纲辨证、脏腑辨 证等;治疗上除内治法外,擅长应用对小儿确有 疗效的熏洗法、擦拭法、热褽法、灌肠法、推拿、 针灸、拔罐法等外治疗法。通过教学,使同学们 充分认识和掌握中医儿科学基本理论和临床认 识与处理儿科疾病的方法,可以直接应用于指 导临床实践。在此基础上,本教材较之以前的 教材,对有争议的一些传统理论进行了科学的 认识和甄别;对一些古代有病名而论述较少的疾病及随着时代变迁而新发生的疾病,在临床 实践和科学研究的基础上,进行了深入探讨和 总结,形成理法方药较全面的创新认识,丰富到 教学之中,既培养了同学们的创新意识,又对应 用中医基本理论创新认识临床疾患做出了示 范。
例如,对于变蒸学说的论述。由于各家对 变蒸的认识历来不尽统一,造成学术论争不断。 主要有两个方面:一是对《小儿药证直诀》“脏腑 变生次第说”的理角解这里的脏腑当然不能简单 化地理解为解剖学脏器,而应从“藏象”学说去 认识;二是变蒸时到底有没有发热等症状。本 教材结合小儿生长发育特点和国外研究(如盖 泽尔氏的枢纽龄学说)佐证,认为变蒸是我国古 代医家在实际观察儿童生长发育特点的基础 上,运用数量极化思路加以归纳总结,进而提出 的一种婴幼儿生长发育呈周期性显著变化规律 的学说。认为其思路、研究方法及研究结果是 基本正确的,应予肯定。它还可以为我们今天 开展科研提供借鉴,如通过对现代中国儿童的 实际观察总结,编制出一套符合中国国情的婴 幼儿智能发育评估系统,用于大规模筛选检查, 为提高我国人口素质服务。同时,以现代中国 正常婴幼儿智能发育水平与古籍中记载的当时 婴幼儿智能发育水平比较,还可以就我们这个这是一项十分有意义的工作。
与其他教材相比,本教材的一大特色是在 现代科研的基础上,创新性地增添了对不少新 病种的中医药认识和处理方法。如新写入了中医治疗具有特色和确切疗效的病种 胎怯。
胎怯,指初生胎禀怯弱之证。本病为新生儿常 见病证之一,现代关于本病的中医研究报道鲜 见。胎怯总因先天未充而患,因而初生便见形 体瘦小,肌肉瘠薄,面无精光,身无血色,目无神 彩,啼哭无力,吮乳口软,毛发黄少等一系列虚 弱证象。认为本病成因总是由于父精不足,或 母体气血供养不充,胎儿在宫内所受滋育不及 所致。病属先天禀赋不足,五脏皆虚,而关键在 于肾脾两虚,治疗以补肾培元为基本法则,提出 用调元散、补肾地黄丸作为常用治疗方剂。开 创了现代胎怯辨证论治方法的先河。
又如对新时期产生或有新认识的中医优势 疾病的增补论述。如厌食、反复呼吸道感染、营 养性缺铁性贫血、多发性抽搐症、手足口病、性 早熟等,从概念、病因病机、诊断辨证到理法方 药的全面阐述,突出了中医药的临床特色。引 用现代研究成果论厌食,提出病因一为饮食不 节,喂养不当;二为先天不足,后天失调;三为多 病久病,伤害脾胃;四为暑湿熏蒸,脾阳失展;五 为环境变化,思虑伤脾。主要病机为脾运失健。 辨证分脾失健运、脾胃气虚和脾胃阴虚三证,常 用不换金正气散、异功散、养胃增液汤分别加减 变化治疗。反复呼吸道感染为在一段时间内反 复出现感冒、扁桃体炎、支气管炎、肺炎等呼吸 道感染。常见病因为禀赋不足,体质柔弱;喂养 不当,调护失宜;少见风日不耐风寒;用药不 当,损伤正气;正虚邪伏,遇感乃发。主要病机 为脏腑娇嫩,肌肤薄弱,藩篱疏松,卫外不固,邪 从外受,脏腑失调。分营卫失和邪毒留恋、脾肺 两虚气血不足及肾虚骨弱精血失充三种主要证 候辨证论治,常用黄芪桂枝五物汤、玉屏风散、 补肾地黄丸加减治疗等。这些都是使本课程教 学与时俱进、贴近现代临床的教学内容的充实。
3启迪学习思路和方法,促进学术研究和临床应用的发展
在以教材为主结合教师讲授的教学过程 中,通过以上理论知识、辨证论治方法和现代科 研成果的教学,可以培养学生的创新精神,激发 学习的主观能动性,培训中医思维方式,启发对 中医儿科学的研究思路和方法,增强探求新知, 解决临床实际问题的能力。在掌握基本理论的 基础上,密切联系儿科临床实际,分析思考,探 讨研究,不断丰富认识,拓展应用,对于学生将 来更快地适应临床需要,并可能成为创新型研 究人才建立良好的基础。
[Abstract] Objective To explore the clinical effect of comfort nursing in patients with secondary hypertension complicated with cerebral hemorrhage. Methods 120 cases with secondary hypertension complicated with cerebral hemorrhage admitted from May 2012 to June 2014 were selected as the subjects and randomized into two groups, the control group and the observation group, treated by the basic nursing intervention and the comfort nursing intervention, respectively. The level of patients’ satisfaction with nursing, quality of life score, Barthel Index score, and nerve function score were observed in both groups. Results After nursing, the Barthel Index score in the observation group was (56.25 ± 6.14) points, which was much higher than that in the control group (P
[Key words] Comfort nursing; Secondary hypertension; Cerebral hemorrhage; Effect
脑出血是神经科中非常常见的疾病,是由于高血压引起的脑动脉病变在血压骤升时血管破裂所致[1]。在继发性高血压并发脑出血患者的恢复期采取及时有效的护理措施,对降低致残率,提高患者的生活质量具有重要意义[2]。为降低死亡率,提高患者的生活质量,该研究特探讨舒适护理在继发性高血压并发脑出血护理中的临床效果,随机选取2012年5月―2014年6月收治的120例继发性高血压并发脑出血患者进行研究,以供临床参考,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2012年5月―2014年6月收治的120例继发性高血压并发脑出血患者作为研究对象,将其随机分为对照组和观察组,各60例。所有患者均符合高血压并发脑出血疾病的诊断标准。
对照组患者:该组患者共有60例,年龄最小患者45岁,年龄最大患者79岁,平均年龄为(55.25±1.26)岁,病程为1~10年,平均病程(5.57±0.85)年,男女性别比例为35:25。合并糖尿病患者15例,合并风湿性心脏病患者18例,合并高脂血症患者12例,合并冠心病患者15例。
观察组患者:该组患者共有60例,年龄最小患者46岁,年龄最大患者78岁,平均年龄为(55.32±1.29)岁,病程为2~11年,平均病程为(5.65±2.41)年,男女性别比例为36:24。合并糖尿病患者14例,合并风湿性心脏病患者17例,合并高脂血症患者13例,合并冠心病患者16例。
排除标准:肝肾功能异常;血液系统疾病;肿瘤继发性出血;颅内动脉瘤;深度昏迷。
对照组和观察组继发性高血压并发脑出血患者的年龄、患者的性别等资料比较无明显差异(P>0.05),能够进行对比。
1.2 方法
对照组护理方法:对照组患者采用基础护理措施,严密观察患者的生命体征,对患者进行护理,给予患者常规健康教育。观察组护理方法:观察组患者采用舒适护理措施。
①舒适环境护理:护理人员应严格保持病房内的空气清新、温湿度适宜,以患者的感觉舒适为标准,勤换床单、被罩,定期开窗换气,保持空气流通,定期对病房进行消毒,降低院内感染的发生率;允许患者在病房内摆放小物件,为病房营造家的氛围,消除患者的陌生感。
②舒适心理护理:继发性高血压并发脑出血患者多伴有偏瘫、失语、大小便失禁等后遗症,会对患者的日后生活造成一定的影响,加上大量的医疗费用,易导致继发性高血压并发脑出血患者出现焦虑、抑郁、烦躁等不良心理情绪,影响患者的治疗及护理,在患者病情稳定后,护理人员可通过鼓励、安慰等方法,增强患者的心理抵抗力,向患者讲解疾病的相关知识及康复的案例,对于语言障碍患者,可采用手势、书写的方法与患者交流,了解患者的心理状态,提高患者战胜疾病的信心,缓解患者的焦虑、烦躁等不良情绪。
③舒适生理护理:护理人员尽量保持病房内的安静,保证患者的休息质量,定期翻身,给予患者皮肤护理及口腔护理,定时用温水擦拭身体,保持清洁,促进局部血液循环,防止压疮等并发症的发生;由临床经验丰富的护理人员进行日常静脉滴注,避免穿刺失败,影响患者的心理感受,并在穿刺前,增加热敷;加强日常巡视工作,防止不良事件的发生;根据患者的具体情况及耐受程度,指导患者进行适当的肢体活动,协助患者翻身及关节活动,促进局部血液循环,防止患者出现痉挛;根据患者的实际情况,给予患者健康的饮食指导,鼓励患者多食易消化、高蛋白的食物,禁食油腻、辛辣等刺激性食物,保持大便通畅。
1.3 观察指标及疗效判定标准
1.3.1 观察指标 对两组继发性高血压并发脑出血患者按照不同的护理方法,实施对应的护理方案,观察两组继发性高血压并发脑出血患者的护理满意度、巴氏指数评分、神经功能评分及生活质量评分。
1.3.2 疗效判定标准 生活质量量表(GQOL-74):分为4个维度,①躯体功能;②心理功能;③社会功能;④物质生活。0~100分,分值越高,生活质量越好。
1.4 统计方法
采用SPSS 18.0软件,对两组继发性高血压并发脑出血患者的各项观察指标情况进行统计处理。采用SPSS 18.0软件,对两组继发性高血压并发脑出血患者的各项观察指标情况进行统计处理。计量资料用均数±标准差(x±s)表示,并采用t检验,计数资料采用(n,%)表示,采用χ2检验,以P
2 结果
由数据可知,护理前,观察组继发性高血压并发脑出血患者的巴氏指数评分、神经功能评分及生活质量评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);护理后,观察组继发性高血压并发脑出血患者的巴氏指数评分、神经功能评分及生活质量评分明显优于对照组继发性高血压并发脑出血患者(P
注:*与对照组相比较(P
3 讨论
继发性高血压主要由于血压长期的偏高所引起的脑动脉病变,在动脉受损发生破裂出血后,进而引发脑出血疾病[3]。继发性高血压并发脑出血的主要临床表现为头晕、偏瘫、食欲下降、意识障碍等,高血压并发脑出血是临床上非常常见的内科疾病,具有较高的发病率、致死率及致残率,严重危害患者的身体健康及生命安全[4-5]。
舒适护理是一种个性化、整体性、系统化的新型护理模式,主要以进一步提高患者在康复过程中的舒适度为护理原则,以此提高护理工作的质量,减轻患者的痛苦[6-7]。舒适护理使患者在生理及心理上达到舒适的状态,对于缩短患者的康复时间、降低心理压力及预防并发症具有重要的作用[8-9]。在本文中,通过给予患者舒适环境护理措施,保持病房内的温湿度适宜,保证患者处于舒适的状态中,通过在病房内摆放小物件,消除患者的陌生感,提高患者的护理依从性;心理护理可有效打消患者心中的顾虑,缓解患者的不良情绪[10]。护理人员可通过鼓励、安慰等方式与患者进行交流,缓解护患关系,向患者讲解疾病的相关知识及康复成功的案例,增强患者的心理承受力,提高患者战胜疾病的信心;通过对患者进行舒适护理措施,给予患者并发症护理,对患者的皮肤及口腔进行护理,定时用温水擦拭身体,能够有效促进局部血液循环;由临床经验丰富的护理人员进行日常静脉滴注,避免穿刺失败,影响患者的心理感受,提高患者的护理依从性[11]。根据患者的具体情况及耐受程度,指导患者进行适当的肢体活动,协助患者翻身及关节活动,促进局部血液循环,防止患者出现痉挛。饮食护理措施能够提高患者的身体免疫力,防止不合理的饮食刺激胃肠道,降低不良反应的发生率,促进患者的康复[12]。
舒适护理措施作为一种新型的护理模式,不仅可以有效地提高护理人员的服务质量,同时还可以降低不良反应的发生率,通过护理人员的娴熟护理技术,得到患者的信任,使患者在心理及生理上达到愉快的状态,促进患者的康复[13]。
11 一般资料 本组48例,男33例,女15例;年龄29~82岁,平均51岁。致伤原因:车祸伤31例,坠落伤13例,殴打伤4例。其中硬膜外血肿8例,硬膜下血肿13例,广泛脑挫裂伤15例,脑内血肿4例,硬膜外、下均有血肿3例,脑干原发性损伤5例。GCS评分≤8分,3~5分者22例,6~8分者26例。伤前均无肾衰竭及糖尿病史。入院后行开颅手术38例,其中去骨瓣减压35例。术后3 d患者GCS评分13~15分4例,9~12分17例,6~8分19例,3~5分8例。
12 临床表现 本组患者均行脑外伤常规治疗并按正常生理需要量补充电解质及液体, 无消化道出血者伤后第3天给予鼻饲流质饮食。患者均于创伤后3~8 d 开始出现低钠血症症状,表现为精神、意识状态改变,消化道症状及四肢抽搐等, 其中19例出现意识障碍加深,15例伴有多尿,尿量4 000~7 000 ml/d,平均为4 900 ml/d。23例去骨瓣减压患者出现不同程度的骨窗张力增高, 行头颅CT 复查均未见颅内迟发性血肿。
13 实验室检查 入院后常规查电解质、血常规、尿常规等,发现低钠血症者根据病情随时检查,并加测24 h尿钠定量。本组48例患者中血钠均低于130 mmol/L,其中12 例低于120 mmol/L,5例低于110 mmol/L;血浆渗透压均80 mmol,其中4例>200 mmol。尿比密度1015~1025者32 例,12 例>1025,4例80 mmol, 血细胞比容偏低者考虑为SIADH;中心静脉压低于049 kPa, 24 h尿钠>80 mmol, 血细胞比容正常或偏高者考虑CSWS。依此确诊SIADH者15例,CSWS者33例。
14 治疗方法 轻、中度SIADH采取限水治疗并予调整脱水药,补充钠盐:先给予缺失钠的一半,再加每天需要量45 g氯化钠。血清钠4 000 ml,在补盐的同时给予适量的抗利尿激素,并适当加大脱水剂量以防治低钠性脑水肿, 同时使用盐皮质激素促进肾小管对钠重吸收。以上治疗过程中均监测血钠、中心静脉压、尿钠、血浆渗透压及尿量。
2 治疗结果
经治疗后血钠逐渐回升,尿钠逐渐下降,本组48例,除2例在伤后6 d和12 d分别死于原发性脑干损伤和广泛脑挫裂伤外,其余患者治疗10~26 d血钠均恢复正常。
3 讨论
31 低钠血症是中枢神经系统疾病继发的一种常见的水电解质代谢紊乱。一般情况下, 继发的低血钠综合征与下列因素有关:①医源性:病后使用大剂量脱水剂和利尿剂, 如糖皮质激素、甘露醇、高渗葡萄糖、呋塞米等, 使大量钠离子从尿中排出, 补液中不含钠离子或含量少。②钠摄入不足。③呕吐时从胃肠道丢失过多。④中枢性低钠血症。本组病例均已排除前3种病因。
在重度颅脑损伤及其治疗过程中,由于原发性脑损伤和继发性病理改变的影响,可造成机体的水电解质平衡紊乱,产生一系列病理生理改变,导致患者病情恶化乃至死亡。SIDH是由于中枢神经系统损伤使渗透压调节中枢功能紊乱,致使抗利尿激素(ADH)分泌增多,肾小管对水的重吸收增加,细胞外液容量增加,体内水潴留,致“稀释性”低钠血症[1]。SIADH诊断标准[2]:①血钠低于125 mmol/L;②尿钠常超过30 mmol/L;③血浆渗透压降低;④尿渗透压超过血浆渗透压;⑤血容量增加,中心静脉压上升,血细胞比容降低;⑥肾功能和肾上腺功能正常。同时必须排除由于肾性失钠所致及其他疾病引起的低钠血症。因此,SIADH的患者是高或正常血容量。而 CSWS则是在颅内疾病的过程中出现的钠自尿中大量流失,并带走过多的水分,从而导致低钠血症和细胞外液容量下降,下隙出血和脑室内出血引出的脑脊液多为血性,行腰椎置管期间应严密观察并记录引出脑脊液的性质、量。当引流出的脑脊液转清,脑脊液常规、红细胞数、白细胞数、蛋白值正常,CT检查示无明显脑积水或积液时,可拔除引流管。
综上所述,腰椎置管外引流治疗脑室出现既缺钠又缺水。常发生于脑外伤后,特别是重度颅脑损伤后,可能与中枢神经系统病变致心钠素(ANP) 或脑钠素(BNP)调节功能紊乱,造成肾小管对钠重吸收障碍有关[3]。但脑外伤后血浆ANP浓度增高机制尚不清楚。CSWS诊断标准[4]:①重症颅脑外伤患者在治疗过程中(1~2 周左右) 出现精神异常和意识改变,部分患者出现消化道症状。②在盐摄入或补给正常情况下出现低钠血症(80 mmol/d), 尿量增加而尿比密度正常,血容量减少,中心静脉压下降,血浆渗透压下降,血细胞比容上升,血尿素氮上升,血浆ANP 浓度可增高。③实验性治疗即补钠补液试验有效,限水试验症状加重。④肝肾功能、甲状腺、肾上腺功能正常。作者认为由于颅内高压的缘故,CSWS血容量低也极少出现低血压情况。从理论上讲,SIADH与CSWS 的鉴别诊断,依靠测定上述相关递质血浓度即可,但是由于应激、疼痛、昏迷、冬眠亚低温等因素影响,使ADH和ANP 的结果在鉴别SIADH 和CSWS 时并不能绝对可靠,而且CSWS 早期ADH 也可以增高,两者鉴别应结合多项临床指标和实验室检查结果等来综合考虑。
参考文献
[1] HARRIGAN M R Cerebral salt wasting syndrome:a review. Neurosurgery, 1996,38:152160.
[2] ZAFONTERD, MANN NR Cerebral salt wasting syndrome in brain injury patients:a potential cause of hyponatraemia. Arch Phys Med Rehabil, 1997,78(5):540542.
【关键词】 IgG; 肝癌; 临床病理学指标; 原位杂交; 免疫组织化学
【Abstract】 Objective:To investigate the expression and distribution of IgG in human liver cancer cells and its correlation with clinicopathological factors of hepatocellular carcinoma.Method:Fresh and paraffin-embedded tissues from 60 cases of HCC tumor with the matched normal liver specimens were detected by two-step immunohistochemistry and in situ hybridization for the expression of IgG protein and mRNA respectively. The relationship between cancer-derived IgG expression and 9 clinicopathological factors were analyzed statistically.Result:Signals of IgG protein in hepatocellular carcinoma cancer cells was significantly stronger than that in its corresponding normal tissues (P=0.001); the over-expression of IgG was negatively correlated with several clinicopathological factors such as tumor differentiation grade and pTNM (r=-0.357,P=0.005;r=-0.296,P=0.021), and positively associated with AFP concentration in serum (r=0.336,P=0.009). However, no correlationship with age, gender, capsular infiltration,tumor size, tumor quantity and recurrence or metastasis of the disease within 1 year was found (P>0.05). Conclusion:Liver-cancer-derived IgG may has a profound impact on the differentiation and pTNM staging of liver cancer cell, and might be served as a tumour marker to help pathological diagnosis and evaluate the prognosis for patients.
【Key words】 IgG; Liver cancer; Clinical pathological factors; In situ hybridization; Immunohistochemistry
First-author’s address:Weifang Medicial University,Weifang 261053,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2014.18.008
近来多项研究证明,乳腺癌、大肠癌、胃癌和肺癌等源于上皮的恶性肿瘤细胞可以产生IgG[1-6]。邱晓彦等[4]最早发现Ig样蛋白的表达与恶性肿瘤的分化有关;依据肿瘤的分化程度不同,Ig样蛋白的表达水平也不同,即分化程度越高,表达强度越低,并证实该Ig样蛋白为IgG;叶雪等[7]发现在恶性卵巢上皮性癌中IgG的表达强度明显高于正常卵巢,IgG的表达水平与卵巢癌的临床分期和病理分级无相关性;李浩勇等[6]对膀胱癌研究发现:膀胱癌细胞能够表达IgG,其抗体体外对膀胱肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用,且具有促进癌细胞凋亡的效应;Niu等[8]研究了IgG的表达与结直肠癌的生物学指标和临床病理学指标的关系,通过siRNA干扰下调IgG的表达,可以抑制结直肠癌细胞(LOVO细胞)的增殖、克隆形成和侵袭能力,提示肿瘤源性IgG具有促进肿瘤生长,转移的作用。肝癌亦属于上皮性恶性肿瘤,但是目前对于IgG在肝癌组织中的表达与分布情况及其与临床病理学指标的关系的研究尚未有报道。本实验采用免疫组化技术和原位杂交技术检测肝癌组织中IgG的表达情况,进而分析其表达水平和肝细胞肝癌9项临床病理学指标的关系,以期为肝细胞肝癌的诊断、治疗和预后评估提供新的方法和思路。
1 材料与方法
1.1 材料来源 收集潍坊医学院附属医院和潍坊市民医院2010-2012年手术切除的肝癌标本60例,其中男40例,女20例,平均年龄45岁,患者术前均未采取任何治疗措施。所有肝癌病例随访12~18个月。本实验经潍坊医学院伦理委员会批准,并获得患者的书面许可。所有新鲜标本均经4%多聚甲醛/PBS固定,石蜡包埋,连续4 μm厚度切片。
1.2 免疫组化方法 采用PV-9000两步法(试剂盒购自美国Zymed公司)进行免疫组化检测。切片常规脱蜡,入水,枸橼酸盐缓冲液微波抗原修复,经3%过氧化氢37 ℃孵育20 min后,滴加小鼠抗人IgG单克隆抗体(1:1000,购自美国sigma公司),4 ℃湿盒过夜,滴加试剂1(聚合物辅助剂),37 ℃孵育30 min,滴加试剂2(辣根过氧化素)标记二抗,37 ℃孵育30 min。各步骤之间均是PBS冲洗3次,每次5 min。AEC显色,苏木素复染,甘油明胶封片。以手术切除的扁桃体组织作为阳性对照,PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 原位杂交方法 切片二甲苯脱蜡,乙醇梯度透明至PBS反复冲洗,酶消化,经预杂交,滴 50μL含探针的杂交液,45 ℃保温,20 h。将切片浸泡于5×SSC(37 ℃)中,后依次经5%甲酰胺2×SSC(37 ℃)清洗15 min。PBS Buffer Ⅰ漂洗一次后,滴加50 μL马血清封闭液,置湿暗盒中室温1 h。后滴加Anti-Dig-Ab(1∶100,购自瑞士roche公司),室温1 h后BufferⅠ、Ⅱ液依次漂洗数次,NBT-BCIP显色。以结肠黏膜下孤立淋巴结作为阳性对照,以IgG正义探针代替反义探针作为阴性对照。
1.4 免疫组织化学结果评分 采用双盲法,由3位病理学教授在400×的显微放大倍数下随机对染色切片独立评分,所得平均分作为最终结果。评分标准如下:(1)阳性细胞数所占比例:小于5%为0,5%~25%为1,25%~50%为2,大于50%为3;(2)染色强度:未着色为0,淡红色或粉红色为1,红色为2,深红色为3。两项测量标准得分之和为0~3分的切片标记为弱染色,阴性;4~6分的切片标记为强染色,阳性。
1.5 统计学处理 采用SPSS 18.0统计学软件对数据进行处理,计数资料比较采用Pearson 字2及Fisher确切概率法检验分析,评估IgG的表达情况与临床病理学参数(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤个数、肿瘤分化程度、AFP浓度、pTNM分期、1年内是否复发或转移)之间的相关性。以P
2 结果
2.1 IgG蛋白在肝癌组织的表达及免疫组化检测结果 经免疫组化检测结果显示60例肝癌组织的IgG蛋白阳性率为85.00%(51/60),癌周正常肝组织的阳性率为6.67%(4/60),两者比较差异有统计学意义(P=0.001)。IgG蛋白阳性染色主要定位于肝癌细胞胞浆和胞膜。
2.2 IgG mRNA在肝癌组织的表达及原位杂交结果 IgG mRNA阳性信号位于肝细胞肝癌细胞胞浆,为蓝紫色,呈颗粒状,与免疫组化结果具有良好的一致性,从mRNA水平证实了肝细胞肝癌组织自身具有产生IgG的能力。
2.3 IgG在肝癌组织中的表达和临床病理学指标的关系 IgG的异常高表达与肝细胞肝癌分化程度和pTNM分期呈负相关(r=-0.357,P=0.005;r=-0.296,P=0.021);与血浆AFP浓度呈正相关(r=0.336,P=0.009);与年龄、性别、肿瘤包膜完整性、肿瘤大小、肿瘤个数和一年内是否复发与转移无相关性(P>0.05),见表1。
3 讨论
免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)是体内免疫球蛋白家族中含量最高的一种,在机体抗感染免疫中发挥重要作用。经典免疫学理论认为IgG仅可由B淋巴细胞经成熟分化过程才能够特异性合成并分泌。近年来多项研究发现IgG在其他多种上皮性恶性肿瘤组织和细胞系中也存在异常高表达的现象[1-2,5,7-8]。Niu等[8]最近发现IgG在结直肠癌组织中和CRC细胞中高度表达,而且此高度表达与肿瘤的分期、淋巴结转移和炎性细胞浸润有密切的关系,提示肿瘤源性IgG可能对肿瘤的发生发展有重要影响。有研究显示在肝细胞肝癌患者的血浆中和肝癌细胞系(BCL-7402)中均可检测到IgG的含量异常增高[2,5,9]。但是在肝癌组织中的表达情况未有报道,肝癌细胞所分泌的IgG的功能未知,其表达和癌症的临床病理学指标的关系也有待于研究。
在本项研究中,笔者分别从蛋白质水平和mRNA水平证明了肝癌组织可以产生IgG。IgG在肝癌中的高表达(85.00%)与肿瘤的分化程度和pTNM分期呈负相关,IgG在分化较差(低分化或未分化)或在处于pTNM Ⅲ~Ⅳ期的肝细胞肝癌组织中的表达比在分化较好(中分化或高分化)或在处于pTNM Ⅰ~Ⅱ期的肝细胞肝癌组织中更为明显;IgG的高表达与血浆AFP浓度呈正相关,与年龄、性别、肿瘤包膜的完整性、肿瘤大小、肿瘤个数和一年内是否复发或转移无相关性。实验结果提示肿瘤源性IgG可能与肿瘤生长有关。免疫球蛋白能促进肿瘤生长的现象已有报道,这主要与“抗癌抗体”阻断癌细胞表面的靶表位有关[10-13]。Taylor等[14]在研究卵巢癌中发现异常糖基化的免疫球蛋白分子不能诱导免疫应答。此外,免疫球蛋白重链,T淋巴细胞受体(例如:TCR-a,TCR-b),免疫球蛋白样黏附分子(例如:CD47,CD54)均可在癌细胞中表达[15]。免疫球蛋白抗体和T淋巴细胞受体可启动补体依赖的细胞毒作用,致使癌细胞凋亡。所以免疫蛋白超家族对于肿瘤细胞可能具有自身保护作用,并与癌细胞的增殖有关。邱晓彦等[4]早期研究了3例肝癌组织,其分化程度均为中度,研究结果显示肝癌细胞中Ig蛋白均具有很高的表达量,因此认为在肝癌组织中IgG的表达程度与肿瘤的分化无相关性。而本研究提示IgG在肝癌中的异常表达与肿瘤的分化程度呈负相关。这种差异可能由于样本量大小不同造成。
甲胎蛋白(AFP)是分子量为64 000~70 000道尔顿的一种糖蛋白,主要由肝细胞粗面内质网上的核糖体合成,是胎儿成长发育的重要蛋白,具有保护胚胎不受母体排斥的作用。AFP在出生后立即消失,若再次出现则提示肝癌或生殖胚胎癌,因此AFP是肝癌诊断、治疗和预后判断的重要指标。贾户亮等[16]分析肿瘤数目、大小和pTNM分期不同的肝细胞肝癌的患者血清AFP水平显示,AFP水平的高低与肿瘤的大小、数目和pTNM分期均呈正相关,其中pTNM Ⅰ期与pTNM Ⅲ~Ⅳ期以及pTNM Ⅱ期与pTNM Ⅲ~Ⅳ期肝细胞肝癌患者血清AFP水平具有显著的差异。
本实验结果表明,血清AFP水平较高(>400 μg/L)
的肝细胞肝癌患者组的IgG阳性表达率(92.8%,39/42),比血清AFP水平较低(≤400 μg/L)的肝细胞肝癌患者(66.7%,12/18)组显著增高,与先前文献报道结果一致。尽管血清AFP含量水平对肝癌的早期诊断有重要意义,但是并非所有AFP升高都可以断定为肝癌,而且并非所有血清AFP含量水平正常就能排除肝癌的可能。在肝炎、肝硬化活动灶等疾病中亦可检测到高水平含量的血清AFP,因此仅仅根据血清AFP浓度来对肝细胞肝癌进行早期诊断是不够准确的[17-18]。所以联合肿瘤源性IgG表达水平的检测可提高阳性检出率,降低漏诊率和误诊。
综上所述,在肝癌组织中IgG表达显著增高,IgG的表达水平与肿瘤的分化、分期有着密切的关系。这可为以后的肝癌的早期诊断和分期判断提供了又一重要指标。研究IgG的表达与肿瘤的生长分化的关系,有助于为肿瘤的免疫治疗提供理想的理论依据,但是对于其功能与分子机制的关系有待于进一步研究。
参考文献
[1]汪涣,张叔人,何祖根,等.免疫球蛋白样物质在上皮来源的恶性肿瘤中的表达[J].中国肿瘤临床,2001,28(12):169-171.
[2]邱晓彦,杨贵贞.恶性肿瘤细胞内存在免疫球蛋白样物质[J].白求恩医科大学学报,1996,22(5):572-575.
[3]邱晓彦,杨贵贞.恶性肿瘤细胞内呈现Ig样物质的特性及其基因结构分析[J].中国免疫学杂志,1996,5(12):296.
[4]邱晓彦,侯春梅,李秀森,等.Ig样蛋白的表达与恶性肿瘤分化及增殖细胞核抗原的相关性分析[J].军事医学科学院院刊,1999,23(1):16-18.
[5]邱晓彦,侯春梅,李秀森,等.多种肿瘤传代细胞中Ig样物质存在与检测[J].癌症,1999,18(11):180-181,184.
[6]李浩勇,梁培育,朱孝峰,等.免疫球蛋白G在膀胱癌细胞中的表达及其抗体诱导肿瘤细胞凋亡的研究[J].中国生理病理杂志,2007,23(6):1068-1073.
[7]叶雪,郭慧方,昌晓红,等.免疫球蛋白IgG在卵巢上皮性癌的表达[J].中国妇产科临床杂志,2007,8(2):192-194.
[8] Niu N,Zhang J,Huang T,et al.IgG expression in human colorectal cancer and its relationship to cancer cell behaviors [J].Plos One,2012,7(11):e47 362.
[9] Olubuyide I O,Salimonu L S,Adeniran S O.Soluble immune complexes and immunoglobulin (IgG, IgA and IgM) levels in Nigerians with primary liver cell carcinoma[J].African Journal of Medicine and Medical Sciences,1993,22(4):57.
[10] Schreiber H,Wu T H,Nachman J,et al.Immunological enhancement of primary tumor development and its prevention[C].Seminars in Cancer Biology,Academic Press,2000,10(5):351-357.
[11] Prehn R T.Stimulatory effects of immune reactions upon the growths of untransplanted tumors[J].Cancer Research,1994,54(4):908-914.
[12] Manson L A.Anti-tumor immune responses of the tumor-bearing host: the case for antibody-mediated immunologic enhancement[J].Clinical Immunology and Immunopathology,1994,72(1):1-8.
[13] Sj?gren H O,Hellstr?m I,Bansal S C,et al.Suggestive evidence that the "blocking antibodies" of tumor-bearing individuals may be antigen-antibody complexes[J].Proceedings of the National Academy of Sciences,1971,68(6):1372-1375.
[14] Taylor D D,Gercel-Taylor C.Tumor-reactive immunoglobulins in ovarian cancer: diagnostic and therapeutic significance?(review)[J].Oncology Reports,1998,5(6):1519.
[15] Lee G,Zhu M,Ge B,et al.Widespread expressions of immunoglobulin superfamily proteins in cancer cells[J].Cancer Immunol Immunother,2012,61(1):89-99.
[16]贾户亮,刑戌健,叶青海.甲胎蛋白在原发性肝癌临床诊断中的应用[J].中国医学科学院学报,2008,30(4):440-443.
[17]赵恒,廖静,刘瑜.甲胎蛋白与肝癌[J].临床肝胆病杂志,2008,24(5):385-387.
[关键词] 核磁共振;关节镜;膝骨关节炎
[中图分类号] R5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2016)02(a)-0013-03
Application of Nuclear Magnetic Resonance Imaging in the Clinical Diagnosis of Knee Osteoarthritis
LIU Huan-zhen
MRI Room, Liaocheng Traditional Chinese Medicine Hospital, Liaocheng, Shandong Province, 252000 China
[Abstract] Objective To investigate the application value of nuclear magnetic resonance imaging in the clinical diagnosis of knee osteoarthritis. Methods 100 cases with knee osteoarthritis admitted in our hospital from April 2013 to August 2015 were selected as the subjects. Arthroscopy and nuclear magnetic resonance imaging was performed successively in the patients with the consent of them. And the results of clinical pathological diagnosis were used as the “golden” standard for comparing the diagnostic accurate rate and missed diagnosis rate of arthroscopy and nuclear magnetic resonance imaging. Results The clinical pathological diagnosis results of the 100 cases with knee osteoarthritis showed that there were 17 cases of meniscus injury, 25 cases of ligament injury, 28 cases of ligament rupture, 30 cases of bone contusion. The diagnostic accurate rate and rate of missed diagnosis of arthroscopy was 82%, 18%, respectively, that of the nuclear magnetic resonance imaging was 96%, 4%, respectively, and the difference in the diagnostic accurate rate and rate of missed diagnosis between the two diagnostic methods was statistically significant (P
[Key words] Nuclear magnetic resonance; Arthroscope; Knee osteoarthritis
膝骨关节炎是当前骨科临床常见病症类型之一,主要是关节软骨面发生了严重的退行性变以及继发性的骨质增生,属于一种慢性关节疾病[1]。经临床研究证实,膝骨关节炎并非是炎症,而是一种退行性变,性质为关节提前老化,特别是患者自身的关节软骨的老化。加之该病症常发生在老年群体之中,因而又被临床称之为老年性关节炎。随着不良生活习惯、老龄化社会的到来,该病症发病率呈现出了显著上升趋势,给患者正常生活带来了较为严重的影响。而准确的诊断是临床治疗取的理想效果的关键[2],基于此,该研究针对核磁共振在膝骨关节炎临床诊断中的应用价值展开深入分析,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取该院2013年4月―2015年8月收治的100例膝骨关节炎患者为研究对象,其中男性64例、女性36例,年龄60~75岁,平均年龄(67.5±2.5)岁,病程时间:6个月~3.5年,临床表现:关节疼痛、关节僵硬、关节肿大、骨摩擦音、活动度下降、有时关节出现绞锁。纳入标准:①经临床病理学诊断确诊为膝骨关节炎者;②无全身免疫系统缺陷者;③临床依从性好者;④同意该研究方案者。排除标准:①先天性膝关节内翻致关节面结构存在严重异常情形者;②膝骨关节炎合并关节感染、血友病等合并症者;③精神障碍者。
1.2 方法
在征得患者知情同意下首先对其实施关节镜检查,所有患者均给予持续性的硬膜外麻醉,选取其硬膜外髌上囊部位作为关节镜穿刺入路点,在将该部位溢液彻底清除完毕后使用注射器抽取生理盐水并沿着关节内侧部位注入到病变部位。在临床医师术野观察下促使膝骨关节炎患者关节腔在生理盐水的扩充下充分扩张以方面关节镜的置入工作。准备工作完毕之后选取患者股骨外踝的上缘前端作为穿刺点位,同时以患者髌腱外侧作为关节镜穿刺的中心点,将关节镜沿着股骨外踝-髌腱外侧方向选取距离真皮层距离大概5 mm处将其表皮组织切割开,并做钝性分离,最后将与关节镜相匹配的套针刺入患者的关节软骨组织之中,观察具体病变部位、范围大小以及与周围组织的黏连程度等。
当关节镜诊断检查完成之后,对其实施核磁共振(Magnetic Resonance Imaging,MRI)检查,仪器为德国西门子公司生产的半开放式永磁0.35T核磁共振仪,膝关节专用线圈,患者取仰卧位,膝关节微屈曲,并外旋15度,设定层距参数为1 mm、层厚3.5 mm,常规之下进行矢状位、冠状位、横轴位扫描检查,必要时可以进行强化。采用双盲法对患者核磁共振影像资料进行分析。
1.3 观察指标
该研究以临床病理学诊断结果作为诊断“金”标准,比对两种诊断方式下膝骨关节炎诊断准确率和漏诊率。
1.4 统计方法
该研究所有数据均采用SPSS 17.0统计软件进行处理,计数资料采用率(%)表示,以χ2检验,P
2 结果
100例膝骨关节炎患者临床病理学诊断结果为:半月板裂痕性损伤17例、韧带拉伤25例、韧带断裂28例、骨挫伤30例。关节镜检查诊断准确率为82%、漏诊率18%,而核磁共振检查诊断准确率为96%、漏诊率4%,组间差异有统计学意义(P
表1 两种诊断方式诊断准确率、漏诊率比较[n(%)]
3 讨论
膝骨性关节炎患者往往由于关节肿胀、剧烈疼痛以及软骨组织出现退行性变性而饱受病痛折磨,使得其身心健康、生活质量遭受到了较为严重的影响。特别是膝骨关节炎多发于老年人群之中,而根据中华人民共和国国家统计局权威数据显示,截至2014年底,在我国境内60周岁以上的老年人口达到了21 242万人,占据全国人口总数的15.5%,65周岁以上的人口为13755万人,占据了总人口的10.1%,并且老年人口数量仍然处于不断上升态势,更是进一步加剧了膝骨关节炎的临床治疗难度与压力。
随着膝骨关节炎临床研究的不断开展,针对该病症的治疗方案得到了有效开发与应用,有力地推动了临床工作的进一步开展。然而,不可否认的是,准确的临床诊断是临床治疗取得理想效果的关键之所在,因而在诊断方法的研究与应用成为了临床关注的重要内容。
当前膝骨关节炎的诊断“金”标准为病理学诊断检查,能够有效区分膝骨关节炎患者病症实际情况并为临床提供准确的诊断依据。但是,不容忽视的问题在于病理学诊断属于有创诊断方式,在诊断工作实施过程中不可避免的给患者身体各项功能带来一定程度的影响,加之患者多为老年人,多数手术耐受能力差,这成为限制病理学诊断检查开展的重要因素,因而并不具有临床广泛推广使用的可行性。而关节镜检(arthroscopy)是当前临床应用在关节腔内部组织及病理形态检查的一种内镜检查方式,临床医师通过关节镜检可以直观清晰的观察到膝骨关节炎患者滑膜、软骨、半月板与韧带组织形态或者是与周围组织的黏连程度,为临床诊断及治疗工作开展提供了可靠信息,因而在临床之中应用范围较广、频率较高[3]。但是,在实施关节镜检过程中尽管创口相对较小,然而却无法否认其仍然为有创检查方式的事实,患者身心依然会受到一定程度影响。并且随着当前膝关节炎病情的日益复杂,通过关节镜检的诊断准确率不可避免的受膝骨关节炎患者生理形态的影响,漏诊率相对较高,不仅贻误了患者的治疗工作开展,同时也造成了医患纠纷的频发,给医疗机构社会形象带来了深远的影响。
核磁共振成像技术是当前西方医学界应用范围较广的一种诊断方式,由于该诊断方式采用磁场成像,并不具有放射性危害,因而在临床应用过程中安全性相对较高,截至目前位置世界范围内的医学界尚未发现因为实施核磁共振检查而发生基因突变或者是体内染色体畸变发生率升高的现象及报道,进一步证实了该诊断方式临床应用的安全性[4]。特别是在骨关节疾病诊断工作中,由于核磁共振成像能够分辨出肉眼所无法分辨出的微小病变,如骨挫伤等,可以为患者开展早期康复治疗提供更具科学性及准确性的依据,具有较高的临床应用价值。该研究中100例膝骨关节炎患者临床病理学诊断结果为:半月板裂痕性损伤17例、韧带拉伤25例、韧带断裂28例、骨挫伤30例。关节镜检查诊断准确率为82%、漏诊率18%,而核磁共振检查诊断准确率为96%、漏诊率4%,无论是在诊断准确率还是漏诊率方面,核磁共振检查结果均优于关节镜检,并且二者之间的差异具有统计学意义(P
首先,核磁共振诊断检查成像参数相对较多。成像参数与膝骨关节炎诊断准确性具有着密切的关联性,通过多参数设置,能够从多个角度观察患者膝骨关节炎病变部位的实际情况,促使临床医师掌握第一首的资料,并通过仔细观察核磁共振所形成的影像资料来判定患者病症严重程度及进展,使得其诊断工作复杂性得到了大幅降低,有助于临床诊断工作的快速开展。
其次,核磁共振检查扫描速度快、组织分辨率高。现有临床研究证实,核磁共振检查基于自身组织分辨率,对于临床常见的脑、甲状腺、肝、胆、脾、肾、胰、肾上腺、子宫、卵巢、前列腺等实质器官病变以及心脏和大血管具有着良好的诊断功能。膝骨关节炎属于一种退行性病变,随着患者年龄的增长,关节软骨组织退化程度随之提升,所以软骨组织退化的诊断鉴别成为该病症诊断工作的核心内容之一。核磁共振组织分辨率高,通过扫描患者膝关节部位能够将患者自身的软骨组织系统、全面的呈现在医师面前,对于发现软骨组织受损程度起到了良好的辅助诊断作用[5]。特别是其扫描速度快,使得患者在整个诊断检查过程中无须过多等待,大幅提高了诊断效率并为患者节省了排队等候时间,因而能够满足患者的临床诊断需求,受到了患者的广泛青睐。
第三,无创性。相较于病理学诊断检查以及关节镜检,患者不需要实施穿刺或者手术,因而身体各项机能所受到的损害程度降至最低,为患者临床治疗工作开展奠定了坚实基础。随着人们自我保健意识的逐渐提高,对于诊断过程中可能受到的损伤情形更加关注,采取核磁共振诊断,不仅有利于患者病情的诊断,同时还能够大幅提高患者满意度,改善当前紧张的医护关系,对于临床工作开展及医疗机构社会形象的树立均具有重要的促进作用。
综上所述,核磁共振诊断膝骨关节炎准确率高,加之其成像参数多、扫描速度快、组织分辨率高等优势,能够帮助临床医师“看见”不易察觉的早期病变,应用过程中安全性高,能够满足患者的临床诊断需求,值得在临床诊断工作中推广使用。
[参考文献]
[1] 仰橄.核磁共振诊断膝骨关节炎临床分析[J]. 亚太传统医药,2013(1):145-146.
[2] 于庆.浅谈核磁共振在疾病诊断中的应用价值[J]. 求医问药,2012(6下半月):189-190.
[3] Jian Zhao,Xiaojuan Li,Radu I. Bolbos,et al. Longitudinal assessment of bone marrow edema-like lesions and cartilage degeneration in osteoarthritis using 3 T MR T1rho quantification[J]. Skeletal Radiology,2010,39(6):523-531.
[4] Sebastian Quirbach,Siegfried Trattnig,Stefan Marlovits,et al. Initial results of in vivo high-resolution morphological and biochemical cartilage imaging of patients after matrix-associated autologous chondrocyte transplantation (MACT) of the ankle[J]. Skeletal Radiology,2009,38(8):751-760.