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免疫学分析方法

免疫学分析方法

免疫学分析方法范文第1篇

【摘要】目的 评价贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测甲状腺激素的效果。方法 测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,分别计算批内精密度、批间精密度、回收率和线性范围。结果 T3、T4、FT3、FT4、TSH的批内精密度分别为4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%,批间精密度分别为6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%,回收率分别为96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%,线性范围分别为0.15~12.3 nmol/L、3.9~387.0 nmol/L、0.3~30.8 pmol/L、1.3~155.0 pmol/L、0.01~150.0 mIU/L。结论 贝克曼全自动化学发光免疫分析系统测定甲状腺功能具有重复性好、准确度高、可报告范围宽、测定速度快等优点,适合于临床应用。

【关键词】化学发光免疫分析法;甲状腺激素

化学发光免疫分析法是20世纪80年代以来发展起来的一项新的标记免疫技术,在临床上有广泛的应用,包括内分泌激素、肿瘤标志物、血药浓度、传染病、心血管疾病标志物、贫血及过敏原等,特别是在甲状腺激素检测中应用更为广泛[1]。本文采用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测T3、T4、FT3、FT4、TSH,对其方法学进行综合评价。

1 材料与方法

1.1 仪器贝克曼全自动化学发光免疫分析仪。

1.2 试剂发光试剂、质控品、标准品由贝克曼公司提供。

1.3 血清来源试验所需血清样本采自本院门诊和住院患者,每例取3ml血,离心3000 r/min,10分钟,取血清-70℃保存备用。

1.4 检测方法利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗夹心法、竞争法相似,严格按试剂盒操作说明书操作。

1.5 评价指标

1.5.1 批内精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本,每种浓度同批平行测定10次,计算平均变异系数(CV)。

1.5.2 批间精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本各10份,每天各测定1次,共测定10天,计算平均变异系数(CV)。

1.5.3回收率:由贝克曼公司提供原装3个浓度的标准品,分别测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,每个浓度平行测定3次,计算平均回收率。

1.5.4 线性范围收集患者血清标本,取T3、T4、FT3、FT4、TSH浓度高于厂家提供线性范围上限作为高值浓度水平(H),厂家提供稀释液作为低值浓度水平(L),用稀释液稀释高值浓度血清,形成如下系列浓度检测标本:1H+0L、4H+1L、3H+2L、2H+2L、2H+3L、1H+4L、0H+1L。用配制成的系列浓度标本平行测定各项指标含量,取平均值作图,取在坐标纸上呈明显直线趋势的各点值进行直线回归统计,取回归系数r大于0.9的浓度范围为可报告的浓度线性范围。

2 结 果

2.1 批内精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%。

2.2批间精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%。

2.3 回收率T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均回收率分别为96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%。

2.4 线性范围T3所测结果得到回归方程为y=1.069x-0.2468,r=0.9966,截距经t检验,ta=1.36,0.95,截距经t检验,ta=0.36,

3 讨 论

血清中三碘甲状原腺氨酸(T3)、四碘甲状原腺氨酸(T4)、游离三碘甲状原腺氨酸(FT3)、游离四碘甲状原腺氨酸(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的测定对甲状腺疾病的诊断具有重要价值。以往国内实验室多采用RIA、MIRA检测血清甲状腺激素水平,此法虽较准确,仪器与试剂也较为低廉,但对操作人员水平要求较高,对实验条件及环境有较多要求,且随着标记抗原的放射性衰减,而使计数不稳定及曲线失真,导致结果偏离,结果重复性差,且可产生放射性污染[2,4]。

近年来发展起来的全自动化学发光免疫分析系统是利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗体夹心法、竞争法相似。其优点是[3,5]:(1)成熟的单克隆抗体技术或独特的磁性微粒子技术,保证了反应的高特异性;(2)检测范围宽,具有良好的稀释线性;(3)试剂稳定性好,不需酶促反应,有效期可长达半年;(4)操作简便,分析过程采用全自动化,减少了人工操作误差,重复性好;(5)试剂及标本均采用无吸附材料,故相互间的交叉污染率低,干扰因素少;(6)真正的随机连续检测,样本随到随测,具有急诊优先插入功能。因此全自动化学发光免疫分析系统是目前检测甲状腺激素等指标的较好方法。

【参考文献】

[1] 陶义训.免疫学和免疫学检验[M].第1版.北京:人民卫生出版社,1997:174.

[2] 叶任高,陆再英.内科学[M].第6版.北京:人民卫生出版社,2004:725.

[3] 罗炜,王慧,陈柏铭.化学发光免疫法与放射免疫法测定血清AFP的比较[J].上海医学检验杂志,2000,15(3):149.

免疫学分析方法范文第2篇

【关键词】学发光免疫分析技术;基本原理;分类;应用

文章编号:1004-7484(2013)-01-0463-01

化学发光免疫分析技术(chemiluminescence immuno-assay,CLIA),是在二十世纪八十年展起来的,它是比荧光免疫测定、酶免疫、发射免疫更先进的一种最新的免疫测定技术。这种技术主要用于对各种抗体、抗原、半抗原、脂肪酸、激素和药物的检测分析,下面就介绍一下这种技术的基本原理和分类。

1化学发光免疫分析技术的基本原理

化学发光免疫分析技术是由免疫分析和化学发光分析两个系统构成的。其中免疫分析是用标记物直接标记在抗原或抗体之上的,然后再经过抗原与抗体反应生成抗体免疫复合物,其中标记物可以是化学发光物质,也可以是某种酶。化学发光免疫分析系统是在免疫反应结束后,加入氧化剂或酶的发光底物,待发光物质氧化后就会形成一个处于激发态的中间体,会发射光子释放能量以回到稳定的基态,发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测,其中被测物的含量就是根据化学发光标记物与发光强度的关系利用标准曲线计算出来的。

化学发光的原理是指分子或原子中的电子吸收能量后,发生能级跃迁而释放光子的过程,能级跃迁过程是电子从基态到激发态的过程,实现了从较低能级向较高能级的跃迁。其中可以根据形成激发态分子的能量来源不同将发光过程分为化学发光(chemiluminescence)、光照发光(photoluminescence)和生物发光(bioluminescence)。

化学发光又可分为直接化学发光和间接化学发光,若参加反应的物质是一个反应产物分子,且被激发到能发射光的电子激发态,那么这就是直接化学发光过程。若参加反应的物质激发能传递到另一个未参加化学反应的分子D上,使D分子激发到电子激发态,D分子从激发态回到基态时发光,这种过程叫间接化学发光。

2化学发光免疫分析的分类

化学发光免疫分析根据应用于免疫分析体系中的方式不同,可以分为以下三类:

2.1直接标记发光物质的免疫分析这种分析方式是用吖啶酯直接标记抗体,作为抗原,然后与待测标本中相应抗体发生免疫反应,就会形成固相包被抗体一待测抗原一吖啶酯标记抗体复合物,到这一步后再加入双氧水氧化剂和氢氧化钠,这样环境就会呈碱性,吖啶酯就会在不需要催化剂的情况下分解、发光。

2.2酶催化化学发光免疫分析标本中的抗原(抗体)在发生免疫反应时所用的标记物为发光的酶,这种化学发光免疫分析方法是酶催化化学发光免疫分析。

2.3电化学发光免疫分析(ECUA)这种分析过程包括电化学和化学发光两个过程,具体是以三丙胺(TPA)为电子供体,用电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应。

3化学发光免疫分析在临床检验中的应用

就目前而言,化学发光免疫分析技术已经成为替代RIA的首选技术,且已经被广泛地应用于基础和临床医学的各个领域。下面就简要地谈谈化学发光免疫分析技术在临床检验中的几个应用。

3.1应用于传染性疾病的病原诊断作为评价和治疗机体免疫功能重要指标的重要血清学标志物乙型肝炎病毒表面抗原、抗体,以前诊断是否感染乙肝病毒用的是常规酶法,常规酶法的缺陷是可能使得部分低病毒含量携带者漏检。但是化学发光免疫分析具有高灵敏度和线性范围宽的特点,在传染性疾病的病原诊断方面其检测灵敏度比常规酶法高,Bowser等在测定感染人类免疫缺陷病毒的围产期儿童体内的单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒甲型肝炎病毒、及丙型肝炎病毒时给出了证明。

3.2应用于肿瘤标志物的分析肿瘤标志物包括蛋白质、酶、癌基因产物、激素等,它是由肿瘤细胞合成释放或机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。在患者的细胞中,血液中以及组织中都存在肿瘤标志物。化学发光免疫分析可以用于寻找新的肿瘤标志物,也可以进行体外早期辅助诊断和对术后的监测,对恶性肿瘤患者的具有重要意义。Mac等达到了对食管癌患者的诊断和病情监测,他们采用的方法就是检测血清中癌胚抗原的浓度、cyfra21-1的浓度、鳞状细胞癌抗原的浓度。Shabin和Raslan比较了AFP和人绒毛膜促线性激素这胎膜早破和健康孕妇阴道液中的两种标志物,发现AFP的敏感性和特异性最高。Sakaida等通过检测细胞色素C的含量得出C可能成为肝衰竭的新标志物。

3.3应用于心脏疾病的特征标记物测定临床上的心脏疾病常常采用同工酶定量测定,标记物为肌酸激酶和肌钙蛋白T\肌红蛋白。Dutra等运用心肌肌钙蛋白cTnT受体分子制成了免疫传感器,可用于临床上早期检测心肌梗死。有文献报道同时检测了cTnT肌酸激酶同工酶CK-MB和肌红蛋白,相关系数分别为cTnT0.953-0.982;CK—MB0.835-0.999;肌红蛋白0.776-0.992,具有很好的相关性可用于检测临床标本。

4结束语

化学发光免疫分析技术具有高特异性和高灵敏度的特点,它将化学分析方法和免疫学分析方法的优点融合了起来,用这种方法分析简便、快速,且标记结合物稳定,没有污染,是非放射性免疫分析方法中最有前途的方法。现在在临床诊断和治疗疾病中应用的全自动化学发光免疫分析仪能够实现试剂稳定自动分析,且可以在短时间内得出精确的结果,可以说化学发光免疫分析检测技术的应用必将为未来迎来新的曙光。

参考文献

[1]魏光伟,余永鹏,魏文康,罗胜军,WEI Guang-wei.YU Yong-peng.WEI Wen-kang.LUO Sheng-jun 化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J].动物医学进展,2010,31(3).

[2]郑开作.化学发光免疫分析技术测定血清TSH及临床评价.福建分析测试研究报告,2001,10(3):1458-1461.

免疫学分析方法范文第3篇

1免疫吸附分析法

现在研究最多的为酶联免疫吸附法(ELISA)和胶体金免疫吸附法(IGCA),两者的共同特点是使用方便、操作简单,能够批量生产且成本较低,能够满足现场快速检测的需要。ELISA常用的酶包括辣根过氧化物酶、磷酸酶、β-D-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶、青霉素酶、乙酰胆碱酶、苹果酸脱氢酶、荧光素酶丙酮、酸激酶等。这些酶都具有易于提取、保存、催化率高、专一性强、活性基团多的优点,同时检测酶活的方法简单快速,在与抗体或抗原结合后酶活会表现出抑制或增强的特点。而IGCA使用胶体金显色,不需要加入酶,标记物更加稳定,应用范围更广,但灵敏度一般不如ELISA好。部分有机磷农药的免疫吸附分析见表1。在应用免疫吸附分析法对有机磷农药进行检测技术的开发中,抗体抗原的选择、样品基质和反应体系中有机溶剂的使用、离子强度和pH都对免疫吸附分析法有较大的影响。在使用通用抗体进行有机磷农药多残留检测分析中,通用半抗原结构上一个元素或者一个基团的变化,都可能引起免疫吸附分析法检测结果的不同。1998年Jeffre等[29]通过一组相似结构的半抗原的免疫反应得到的抗体进行ELISA对比试验,得出同类半抗原的不同链长、P上连接的O或S都会影响得到的抗体的性质,从而影响对不同农药的特异性吸附。Manchis等[30]利用两种类似结构的半抗原产生的抗体来对毒死蜱进行检测,得到不同的标准曲线,juan等[19]在对毒死蜱进行ELISA检测实验中也得到相同的结论。Josep等[31]用ELISA对甲基谷硫磷和亚胺硫磷进行检测中,也得出不同结构的半抗原产生的抗体对检测结果影响较大。McAdam等[32]利用多克隆抗体对杀螟松进行ELISA检测,得出IC50为23ng/mL,最低检出限为2ng/mL,而Cho等[33]利用单克隆抗体对其进行ELISA,同样基质中得出IC50为3.7ng/mL,最低检出限为0.5ng/mL。2006年Watanabe等[34]利用计算机模拟得出的结果IC50为0.23ng/mL,线性范围0.087~2ng/mL,最低检出限为0.033ng/mL。McAdem和Hill[32]用杀螟松单克隆抗体进行ELISA检测得到的线性范围是100~2000ng/mL,Skerrit等[35]发现杀螟松的单克隆的抗体还会与甲基毒死蜱和甲基嘧啶磷反应。样品的基质对免疫吸附法的稳定性也有一定影响。在杀螟磷的检测中,样品为苹果时,平均回收率为112%,变异系数10%,样品为桃子时,平均回收率为111%,变异系数12%[34]。2011年梁赤周等[36]分别在梨、香蕉、坚果、大米、菠菜、胡萝卜中用ELISA对三唑磷进行检测,得到的加标回收率和变异系数都有差异。亚胺硫磷在苹果、橙汁和苹果汁的ELISA检测中,加标回收率和变异系数也各不相同[37]。Ercegovich等[38]检测血浆中的对硫磷残留检出限为280pg/mL,在缓冲液中灵敏度能增加10倍。而有些农药的检测中,基质效应可以忽略,如Lvanov等[39]对谷硫磷检测中蜂蜜的基质效应可忽略不计。反应体系中使用的有机溶剂、离子强度和pH都对免疫吸附分析法也会有较大的影响。Xu等[40]在对河流、湖泊及地下水样品中对硫磷的检测后发现,使用固相萃取工艺前后,剂量-反应曲线变化较大。在有机溶剂的使用中,甲醇容易造成负面的影响[25,41]。此外,反应体系的pH及离子浓度都会对检测结果造成影响[16,20,21,24,25]。交叉反应率在免疫吸附分析法中主要受抗体类型的影响,使用单克隆抗体进行ELISA,除结构特别类似的化合物外,交叉反应率较低。Watanabe等[34]报道,在检测杀螟松的交叉反应中,只有3种农药交叉反应率较高,结果如表2。2011年Young等[42]使用毒死蜱单克隆抗体的IGCA对毒死蜱检测进行交叉反应试验,仅甲基毒死蜱IC50为190ng/mL,交叉反应率为13%,其余8种类似农药均无交叉反应,特异性良好。Manchis等[30]利用ELISA对毒死蜱进行交叉反应实验,甲基毒死蜱交叉反应率也仅为18.3%,其余六种农药均小于4%。sullivan等[43]对毒死蜱检测试验也得到相似的结果。在亚胺硫磷的检测中,单克隆的抗体建立的ELISA方法在交叉反应实验中也表现较好[37]。

2其他免疫分析法

化学发光免疫分析法,电化学发光免疫分析法,荧光免疫分析法及放射免疫分析法也是较为常见的免疫分析方法。自1977年Halman等[22]创立了化学发光免疫分析方法(CLIA)以来,在临床医学、环境和食品安全检测中进展很快。化学发光分析是用能够产生化学发光的物质来标记抗体或抗原,在与待测的抗原或抗体免疫吸附后,分离发光标记物或直接加入发光启动剂而进行抗原或抗体的定量或定性分析。最常用的发光标记物为鲁米诺及其衍生物、吖啶酯衍生物、过氧化物酶和碱性磷酸酶。其中辣根过氧化物酶与碱性磷酸酶在临床检验中应用最广泛[44]。Jin等[45]在2010年建立了果蔬中有机磷农药三唑磷的CLIA法,线性范围为0.04~5ng/mL,最低检出限为0.063ng/mL,生菜、胡萝卜、苹果、水和土壤的加标回收率在67.52%~122.0%之间。与液-质法进行对比,显示出良好的准确性。电化学免疫分析法(ECLIA)通过在电极上施加一定波形的电压或电流信号,使体系中的组分反应产生化学发光对物质进行定量定性的分析。相比CLIA,是用电极代替发光启动剂,能更精确的控制反应的开始。Wei等[46]利用ECLIA对甲基毒死蜱进行检测,得到线性范围在0.4~20ng/mL,在土壤和葡萄中的加标回收率96.4%~109.3%,变异系数为9.1%。Cons等在1941年用荧光素和抗体的结合来定位组织中的抗原,提出了荧光免疫分析法(FIA)的概念[47]。荧光素是该方法的关键,在特定波长的激发光照射下,有机荧光分子被激发并发出荧光,这些荧光分子能在短时间内多次重复被激发用以检测。荧光免疫分析法就是根据荧光分子的这种特性进行定量分析的。FIA对甲基对硫磷检测的加标回收率在85%~100%之间,交叉反应试验与检测耗时表现比ECLIA好[48]。荧光偏振免疫测定法(FPIA)甲基对硫磷检测的加标回收率85%~110%之间,最低检出限为15ng/mL,线性范围为25~10000ng/mL,且变异系数为1.5%~9.1%,交叉反应表现良好[49]。Xu等[50]在时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)对有机磷农药多残留检测中,检出限低于10ng/mL,变异系数在3.5%~14.5%之间,加标回收率71.3%~126.8%[51]。水样的加标回收率从74.8%~121.3%不等,变异系数在6.4%~15.1%之间。放射免疫分析方法(RIA)是利用同位素标记的和未标记的抗原混合物与抗体发生竞争性免疫反应,通过检测游离同位素标记抗原达到对抗原定量定性分析。1960年美国化学家R.S.耶洛和S.A.贝尔森提出此法后,被广泛用于生物学和临床诊断分析中,为此耶洛于1977年获诺贝尔生理学医学奖。80年代初,应用此法测定的生物活性物质已达300种以上。1981年Ercegovich等[38]首先建立了RIA对硫磷的检测,在人的血液和莴苣叶片上的检出限为10~20ng/mL,水中的检出限可达4ng/mL。

免疫学分析方法范文第4篇

【关键词】 接种疫苗告知制度;免疫;接种率;不良反应

为了探讨实施接种疫苗告知制度对计划免疫接种前后的接种率和不良反应发生率的影响, 本研究于2012年1月以来在本社区实施计划免疫接种疫苗告知制度, 并统计2013年1~12月计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率, 与2012年1~12月实施计划免疫接种疫苗告知制度前的计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率进行对比分析, 现将分析结果报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2013年1~12月实施计划免疫接种疫苗告知制度的儿童734名, 其中男家长434名, 女家长300名;年龄23~52岁, 平均年龄(35.14±4.02)岁;对每名受种者在接种疫苗前均要求监护人或本人仔细阅读该疫苗接种告知书或知情同意书并签名。2012年1~12月实施计划免疫接种疫苗告知制度前的儿童740名, 其中男家长484名, 女家长256名;年龄23~51岁, 平均年龄(35.08±4.00)岁。

1. 2 疫苗告知的种类 实施疫苗接种告知主要有两类, 一类疫苗, 包括乙型肝炎疫苗、口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)、百白破联合疫苗(DPT)、麻疹风疹减毒活疫苗、流脑疫苗、麻风腮联合疫苗、乙型脑炎减毒活疫苗、甲肝减毒疫苗等疫苗[1]。二类疫苗, 包括甲型肝炎(HepA)疫苗、肺炎疫苗、流行性感冒疫苗、水痘疫苗、HIBb型嗜血流感杆菌疫苗、口服轮状病毒疫苗等。

1. 3 告知内容 接种前签订知情同意书, 内容主要包括接种性质、疫苗性质、疫苗的成分、生产单位、接种对象、接种方法、剂量、接种禁忌证与不良反应、注意事项、明确告知接种后反应及处理方法, 受种者或其监护人意见与签名, 再行疫苗注射[2, 3]。

1. 4 调查方法 本次调查选取具备丰富专业工作经验的经市级和区级计划免疫规划管理部门工作人员作为现场调查员, 对2012年1~12月和2013年1~12月的计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率情况进行统计和分析。

1. 5 统计学方法 本研究采用SPSS17.0版软件包对2012年1~12月和2013年1~12月的计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率情况进行统计和分析, 计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验, 计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验, 以P

2 结果

2. 1 实施接种疫苗告知制度前后疫苗接种率和接种及时率比较 实施接种疫苗告知制度后(2013年1~12月), 儿童计划免疫疫苗接种率(98.37%)和接种及时率(97.00%)均较实施接种疫苗告知制度前(2012年1~12月)(88.92%、84.32%)明显提高, 且差异具有统计学意义(χ2=4.95、4.82, P

2. 2 实施接种疫苗告知制前后疫苗接种不良反应发生情况比较 在实施接种疫苗告知制前(2012年1~12月)统计的658名儿童中发生不良反应6例, 不良反应发生率达0.91%;而在实施接种疫苗告知制后(2013年1~12月)统计的722名儿童中发生不良反应1例, 不良反应发生率为0.14%;经统计学分析发现实施接种疫苗告知制后的不良反应发生率明显低于实施接种疫苗告知制前, 且差异具有统计学意义(χ2=8.11, P

3 讨论

计划免疫(planed immunization)是根据某些特定传染病的疫情监测和人群免疫状况分析, 有计划地利用疫苗进行预防接种, 以提高人群的免疫水平, 预防、控制乃至最终消灭相应传染病的目的[4]。计划免疫是一种比较方便、经济、有效的手段现, 已成功地消灭曾经是人类头号杀手的天花[5]。随着生物技术的不断发展, 新的疫苗被不断开发及使用, 在接种过程中, 极少数儿童在接种疫苗的过程中还会不时出现一些不良反应, 如果缺乏接种前的有效沟通很容易造成纠纷[6]。近年来, 随着人们对健康水平的重视, 以及医学科学的不断发展, 新的预防接种的疫苗不断出现, 纠纷的发生率也在不断上升, 由于不同疫苗的接种对象、接种方法、接种程序、接种途径、接种禁忌等都会存在不同, 给计划免疫的接种工作带来了不良影响。因此, 需要规范接种工作, 对于接种过程中出现了差错, 负责接种的工作人员将承担相应的责任。

根据我国规定, 在进行计划免疫的过程当中, 计划免疫是带有法律属性的, 在计划免疫接种前进行预防接种的告知制度体现了尊重公民的知情权, 体现了以人为本的中心原则, 实现了将计划免疫工作科学化、规范化的目标, 使得预防接种的相关工作能够向着规范化、科学化、制度化发展。医务人员通过履行告知的义务, 并要对于外来儿童的家长进行相关疫苗接种的相关知识的宣教, 对于免疫疫苗接种的重要性进行强调, 在实施接种的过程中给予核对卡证、预检、知情告知、登记、疫苗接种、观察等多个环节, 严格执行查对制度, 从而维护接种儿童家长的知情同意权[7]。

总之, 进行疫苗的接种告知制度, 对于免疫疫苗的相关知识能够进行宣教, 可以让接种疫苗的儿童家长对接种工作引起足够的重视, 使得儿童的家长对于接种疫苗的认识更加清晰, 增强了儿童家长了解预防接种知识的积极性, 激发了儿童家长的求知欲和与医务人员主动沟通的愿望。要求家长能够对于儿童的过敏史和接种史进行如实的反应, 一旦出现不良反应, 能够及时有效地进行处理, 避免相关医疗纠纷的发生, 使得预防接种的相关工作更加顺利。本研究于2012年1月以来在本院实施计划免疫接种疫苗告知制度, 并统计2013年1~12月计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率, 与2012年1~12月实施计划免疫接种疫苗告知制度前的计划免疫疫苗接种率和不良反应发生率进行对比分析。研究结果显示通过实施接种疫苗告知制度, 与儿童家长签订知情同意书, 履行告知义务, 可让家长了解相关知识, 可以有效提高免疫接种率和及时接种率, 另外还可以有效降低不良反应的发生, 为减少医疗纠纷提供了证据, 起到了保护医务人员的作用。

参考文献

[1] 宫丽萍, 任继风, 陈琦, 等.疫苗接种知情同意书在儿童计划免疫中的应用.齐鲁护理杂志, 2012, 18(26):132.

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[3] 车荣.新生儿首针疫苗接种告知记录单的设计与应用.护理学杂志, 2012, 27(9):47.

[4] 李春华, 柳国锋.实施疫苗接种告知制前后免疫接种率分析.河北医学, 2007, 13(12):1326-1327.

[5] 钱晓华, 杨平, 伍平, 等.实施接种疫苗告知制前后免疫接种率和不良反应发生率分析.中国计划免疫, 2005, 11(4):306-308.

[6] 钟纪荣, 雷红霞, 刘全亮, 等.甘肃省武山县儿童监护人免疫预防接种KAP调查分析.中国初级卫生保健, 2013, 27(1):68-70.

免疫学分析方法范文第5篇

关键词:临床免疫;免疫检验;自动化;发展与规划

随着电子信息技术的不断进步,临床检验亦在不断更新,成为当今医学领域进步最快的学科之一,其中临床免疫检验的推陈出新更是佼佼者。免疫检验已由全手动操作,逐步过度至班自动化操作,目前我国部分经济发达地区先进医院已优先步入全自动化阶段。本文就免疫检验自动化的概念、目前发展现状、以及未来发展规划作一简单总结。

1免疫检验自动化的概念

"自动化",顾名思义为计算机操作取代人工手动操作。而免疫自动化,即运用计算机技术参与免疫检验操作、调定的技术。其中包括样本调控、试剂掌控等免疫检验基本操作过程;检验结果与数据自动处理,以及故障自动报警系统与自救系统等。

2当前免疫检验自动化发展现状

免疫检验技术的不断进步是适应我国当前医疗环境的自我完善。众所周知,医少患多不仅仅是临川科室的突出问题,在检验科,检验医师与待检样本比例严重失调是大多数医院检验科面临的一大难题,故如何提高检验效率是迫切需要解决的问题。

免疫检验自动化具有高效、高灵敏度等优点,其在检验科的应用价值已逐渐凸显,虽然该技术在我国起步较晚,但其发展及其迅速。我国免疫检验自动化系统起步于上世纪70年代,至今40余年间逐步成熟。多年的临床经验证实,免疫检验自动化技术具有高灵敏度、特异度,且对于干扰因素的分析和排除能力强于手动操作,能有效避免误差的发生[1]。

3免疫自动化技术进展

3.1免疫标记测定自动化系统的进展 免疫标记是运用抗原抗体反应的原理,对目标AG/AB或介导AG/AB进行标记,从而根据对待测目标进行追逐、测定的技术,常用的标记手段有荧光素、放射性同位素、酶等,并可根据标记手段的差异分为免疫荧光技术、放射免疫测定技术以及酶标技术等等。前两种免疫标记技术目前应用频率较高,有很高临床应用价值,但亦有一定缺陷,如放射性同位素价格昂贵,对人体具有致癌和致畸作用等;而应用荧光素的免疫荧光标记技术耗时较长,实现全自动化有一定难度。免疫标记技术另一大突破是化学免疫技术的发现,其标记物为花光物质。虽然该技术起步较晚,但由于其高信度、效度优点,有效避免了耗时常和生物有机体放射毒性等弊端,已成为当前免疫标记技术的领军项目。

总体而言,免疫标记技术具有高灵敏度、高特异性等优点,在激素水平测定,各种类型肝炎病毒AG/AB测定以及肿瘤标志物水平等多种蛋白类物质的测定中具有及其重要的应用价值。

3.2免疫浊度测定自动化 免疫浊度是在光学手段辅助下,根据抗原抗体复合物能增加透明液体浊度的原理,通过分析液体浊度推断目标AG/AB含量的技术。根据光学手段的差异,可将免疫浊度测定技术分为散射比浊法和透射比浊法两大类,下面逐一介绍。

3.2.1散射比浊法 散射比浊法是将一定波长的光束,对混有抗原抗体复合物的溶液照射,光束垂直通过溶液时,在照射致AG/AB复合物时会发射不同角度的折射,而折射的角度与AG/AB复合物的量、微粒大小相关,故可以通过散光光度自动分析处理系统,测定溶液中AG/AB复合物以及目标抗原的含量。

散射比浊法免疫浊度测定技术具有高效、敏感等优点,尤其是对于血浆蛋白含量的测量,精确度较高。该技术主要缺点为其要求与目标待测抗原发生反应的介质抗体质量要求高,主要为避免AG/AB复合物微粒大小参差不齐对自动处理系统产生的结果误差。

3.2.2透射浊度法 透射浊度法的原理是一定波长的光束在透过混有抗原抗体复合物的溶液时,会被其吸收,从而在光路方向收集光强度,并计算原光束强度与溶液中光束强度差即为溶液吸光度,溶液吸光度与AG/AB复合物微粒数目有关。

全自动生化分析仪中运用透射浊度法进行溶液分析的较多,该技术适用度广,对抗体和试剂无特殊要求,只要溶液中AG/AB复合物分子微粒大小适合、AG/AB复合物量足够均可采用该方法测定。

除上述免疫标记测定自动化系统、免疫浊度测定自动化外,多种自动化免疫分析仪器亦在临床免疫检验中广泛应用,其应用的技术亦较为先进。而当前常用的自动化分析仪器有AXSYM全自动快速免疫分析系统、Vitros ECi全自动增强化学发光酶免分析仪系统、auto DELFIA全自动时间分辨荧光免疫检测系统等。

随着临床免疫检验技术不断更新进步,免疫检验自动化已逐步取代传统手工操作,且具有更高的准确性及灵敏度,值得临床进一步推广。