异型淋巴细胞范文第1篇

关键词：儿童传染性单核细胞增多症；白细胞；异型淋巴细胞；ALT

传染性单核细胞增多症（infectiousmononucleosis，IM）是一种临床常见的、与EB病毒感染密切相关的综合征[1]，它属于一种单核-巨噬细胞系统急性增生性传染病。该病多见于学龄前与学龄儿童，主要由飞沫与唾液经呼吸道传播，其次经密切接触传播。EB病毒感染会导致外周血象和肝功能的变化，白细胞、异型淋巴细胞是临床诊断传染性单核细胞增多症的重要参考指标。本文旨在探讨儿童传染性单核细胞增多症患者白细胞、异型淋巴细胞和丙氨酸氨基转移酶（ALT）的变化，为临床诊断和治疗提供实验依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2011年1月～2014年3月传染性增多症患儿154例，年龄在8月～14岁，平均年龄5.1岁，中位数年龄为4.5岁，就诊时患儿发热1～18d。所选患儿均行血液分析检测患者外周血象和肝功能ALT等指标，并结合临床表现，严格按照《实用儿科学》[2]中的诊断标准由专科医师进行诊断。

1.2 方法 应用迈瑞BC-5300全自动五分类血液分析仪检测传染性单核细胞增多症患者EDTA抗凝的全血标本中白细胞、应用瑞氏涂片染色镜检法检测异型淋巴细胞。应用迈瑞BS-400生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶。WBC计数超过10×109/L、异型淋巴细胞占白细胞总数百分比超过10%、ALT超过正常参考范围上限40IU/L判为异常。

1.3 统计学处理 采用EXCEL 2007进行数据处理和统计分析。

2 结果

3 讨论

IM是一种儿科常见的感染性疾病之一，以发热、咽峡炎、淋巴结及肝脾增大为主要临床特征，实验室检查可发现外周血淋巴细胞增加并出现异型淋巴细胞[3，4]。本文各组大部分患儿中由EB病毒感染所引起，该病毒在人群中普遍存在，至20岁时人群感染率高达90%[5]。IM在全世界不同地区发患者群存在着年龄分布差异性，在发达国家多见于青少年，在发展中国家的发病高峰年龄为2～6岁[6]。IM外周血象特征性改变为淋巴细胞增多（>50%），并出现异型淋巴细胞（>10%），被认为是IM诊断标准之一[7]。本结果显示，传染性单核细胞增多症患者外周血白细胞异常升高117例，占76.0%；异型淋巴细胞异常升高率96.1%。此外，本研究结果还显示，44.8%的IM患儿血清ALT异常增高，这说明部分IM患者存在不同程度的肝功能损伤。这一结果与文献报道相符[8]。这一点值得也临床医师高度重视，对于IM患者要严密监测肝功能的变化，并采取有效的防治措施，减少肝功能损伤并发症的发生。

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异型淋巴细胞范文第2篇

    【摘要】  淋巴系统增生可导致淋巴增生性疾病，淋巴增生性疾病可分为反应性（或免疫性）和恶性两大类。引发淋巴增生性疾病有多种病因，本文重点介绍了淋巴增生性疾病发生的病因以及细胞形态学、免疫学、遗传学、分子生物学等检查在淋巴增生性疾病分类中的应用及意义。

    【关键词】  淋巴系统；淋巴增生性疾病；霍奇金淋巴瘤；非霍奇金淋巴瘤

     淋巴细胞是人体的重要免疫细胞。在各种抗原的作用下，淋巴细胞增殖和分化，参与免疫应答。并可使淋巴组织如淋巴结、胸腺、脾脏及黏膜等增生。淋巴系统增生可导致淋巴增生性疾病发生，淋巴增生性疾病可分为免疫性（或反应性）和恶性两大类。

1  淋巴增生性疾病的病因与分类

    1.1  免疫性或反应性淋巴增生性疾病  由免疫反应所引起的淋巴系统增生性疾病，常伴淋巴细胞形态异常，故常被称为非典型淋巴增生（ail），多为良性，但也可发展成恶性［1］。（1）病毒：常见致病病毒为eb病毒，所引起的淋巴增生性疾病是传染性单核细胞增多症。其他病毒如巨细胞病毒、人类免疫缺陷病毒（hiv）、人类t细胞淋巴瘤／白血病i型病毒（htl-i）、sars病毒、疱疹病毒、流行性出血热病毒等也可导致非典型淋巴增生（ail）。（2）细菌及其他病原体：如结核杆菌、麻风、梅毒、布鲁杆菌、猫爪病、弓形体、组织胞浆菌、衣原体 （如性病淋巴肉芽肿）、利什曼原虫等。（3）移植后淋巴增生性疾病（ptld）：1997年世界卫生组织（who）将移植后淋巴增生性疾病分为四类：①早期；②多形ptld；③单形（ptld）；④其他少见型。ptld的发病率最高是在移植后1年。（4）药物：如免疫抑制剂，抗淋巴细胞球蛋白、皮质激素、环孢素a、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤等，这些药物引起淋巴增生性疾病的机制，有些与ebv感染有关。（5）自身免疫性疾病：类风湿关节炎的患者，t细胞中存在一种缺陷，不能抑制ebv，易遭ebv感染，导致淋巴细胞增生。患者用甲氨蝶呤、硫唑嘌呤治疗，容易发生淋巴增生，停药后可恢复。而干燥综合征患者发生淋巴增生，恶性病变的危险性为正常人的40倍。（6）遗传性免疫缺陷：  x染色体连锁淋巴增生是一种由于x染色体突变所致免疫缺陷性疾病，多见于男孩，有淋巴结肿大，皮肤、肝、肺、骨髓、大脑等部位可发生淋巴瘤。而wiskott-aldrich综合征，发生弥散性淋巴瘤约50％。（7）fas基因突变所引起的自身免疫淋巴增生综合征（canale-smith综合征），是一种少见的淋巴增生疾病，其特点为淋巴细胞增生，凋亡受阻，并伴自身免疫性溶血，血小板减少，粒细胞减少。大多发生在儿童，易演变为淋巴瘤。（8）原因不明的不典型淋巴增生性疾病：   如castleman病（cd），又称血管滤泡淋巴增生或巨淋巴结增生症、组织细胞性坏死性淋巴结炎［也称坏死性淋巴结炎、病毒性淋巴结炎或kikuchi（菊池）病等］。castleman病（cd） 临床上可分为局限型和多中心型两种；根据病理组织学，又可分为透明血管（hv）型、浆细胞（pc）型和混合型三类，以第一种多见。可发展为恶性淋巴瘤［2～6］。组织细胞性坏死性淋巴结炎，多见于东方人（日本、中国），发生在青壮年，临床上表现为发热，颈部淋巴结肿大、常有痛，白细胞增高或减少，外周血中有异形淋巴细胞。

    1.2  淋巴系恶性增生性疾病  病因尚未阐明，与病毒及相关病原体有关。

（1）病毒：如t细胞淋巴瘤／白血病i型病毒（htl-i）、hiv感染，当cd4+细胞降至50／mm3时，易引起非霍奇金淋巴瘤（nhl）;ebv与burkitt淋巴瘤相关；hcv感染的患者可发生边缘区b细胞淋巴瘤；发生弥漫型大淋巴细胞淋巴瘤的危险性较正常人大2倍以上。

（2）幽门螺旋杆菌  2003年nakamura等报道59例持续感染引发黏膜相关淋巴瘤（malt）患者中，幽门螺旋杆菌感染阳性者高达50例，用抗螺旋杆菌治疗后，41例完全缓解或部分缓解。

淋巴恶性增生可浸润至造血系统，引起急性和慢性淋巴细胞性白血病；也可原发在淋巴结和淋巴组织，称之为恶性淋巴瘤［7，8］。1997年who根据细胞来源将淋巴组织恶性肿瘤分为b细胞、自然杀伤（nk）细胞/t细胞以及霍奇金淋巴瘤三大类。2001年who将恶性淋巴瘤又分为霍奇金淋巴瘤（hd）及非霍奇金淋巴瘤（nhl）两大类，霍奇金淋巴瘤（hd）占恶性淋巴瘤14%。淋巴瘤的早期及晚期都可累及骨髓并伴白血病血象，除淋巴组织的活检外，从骨髓、血象和体腔积液中检查发现淋巴瘤细胞［9］。

2  淋巴增生性疾病的实验室诊断

   淋巴增生性疾病的诊断必须依据临床表现、实验室检查包括血象及骨髓象，有时必须有淋巴结或病变部位的病理切片检查才能确诊。

    2.1  细胞形态学检查（1）反应性或免疫性淋巴细胞增生： 反应性增生的异形淋巴细胞大多为幼淋或成熟淋巴细胞，如ebv所引起的传染性单核细胞增多症，血象中可见泡沫型、不规则型或幼淋细胞，也可见浆细胞样淋巴细胞，一般与白血病细胞不难鉴别。反应性坏死性淋巴结炎的外周血中也常见幼稚淋巴细胞，但无核仁，淋巴结活检可助鉴别。

（2）恶性淋巴增生性疾病： 急性淋巴细胞白血病细胞的原始细胞多见畸形。慢性淋巴细胞白血病外周血中增多的淋巴细胞，大多是成熟淋巴细胞，属b细胞。弥漫型小淋细胞、弥漫型裂细胞和淋巴母细胞淋巴瘤易并发白血病，外周及骨髓血中所见淋巴细胞属幼稚或原始淋，形态畸形。霍奇金淋巴瘤（hl）在骨髓涂片中可见具有诊断价值的reed-steinberg细胞，血象一般无特殊［1］。

（3）大颗粒淋巴细胞增生（lgl）  有4种不同的临床表现：①反应性一过性增生，继发于感染，如结核等；②慢性lgl增生，病程呈良性，34％血液中存在自身抗体，类风湿因子2％阳性；③惰性lgl白血病，大多发生在老年人，60％～70％有临床症状，表现为慢性粒细胞减少，贫血，多发性关节炎，甲氨喋呤、环孢素a、环磷酰胺治疗有效；④侵袭性lgl白血病，与侵袭性nk细胞白血病可能属同一恶性淋巴细胞增生性疾病，病程短，预后差［10，11］。

    2.2  免疫表型检查  淋系白血病中常见免疫表型：

    （1）t系急淋：   cd2、cd7对急淋的特异性较高，胞浆cd3（ccd3）及膜表面cd3-（smcd3-）对t细胞急淋也有较高的诊断价值。t-all中以cd5和cd2共同表达者多见。10％cdl、cd4、cd8共同表达。（2）b系急淋：   hla-dr敏感性高，但特异性差；cd20、cd22对b系急淋特异性高，但敏感性较差。

①早期前b细胞急淋cdl9、cd24、cd34，50％成人b细胞急淋阳性；

②前b急淋，cμ阳性，cdl0 90％以上阳性，大多属all-l1型；

③b细胞急淋cdl0、cdl9、cd20、cd24常阳性，75％形态学上属all-l3。中间成熟b smlg阳性，多见于all-l3型急淋。

   （3）慢性淋巴细胞白血病（cll）：  主要为b细胞型，cd5多数阳性，少数阴性，cdl9、cd20、hla-dr阳性。smig弱阳性，以igm和igd为主。  

（4）特殊类型白血病的免疫表型：   ①多毛细胞白血病cdl9、cd20、cd22、smig阳性，cd21阴性。cdllc、cd25、cdl9、cdl03（粘附因子抗原）阳性，有较高诊断价值。②80％～90％nk细胞白血病cdl6阳性，95％以上cd56阳性。cdl58a、b及cdl61、cd57也可呈阳性。

③大颗粒淋巴细胞白血病源自二类免疫表型细胞：来自cd3+及cd57+t细胞占85％；来自cd3-／cd56+nk细胞，占15％。大颗粒淋巴细胞白血病必须与慢性（nk）lgl淋巴细胞增生相鉴别。后种疾病中的大颗粒nk细胞cd56（-）或表达弱（cd56-／+dim），cd11b（-／+dim），cd>（-／+dim）cd2+，cdllc，cd38（-／+dim）。

（5）间变性大细胞淋巴瘤合并白血病这是一种好发于青壮年的淋巴瘤，约占成人nhl的2％～8％，约30％累及骨髓。间变性大细胞淋巴瘤对化疗的效果较好。近几年实验研究表明，恶性组织细胞病的实质多为间变性大细胞淋巴瘤（alcl）或噬血细胞淋巴组织细胞增生症（hlh）。who公布的淋巴组织与造血组织肿瘤分类，恶性组织细胞病已不存在。

其他淋巴瘤并发骨髓及外周血白血病血象和骨髓象中淋巴细胞免疫表型随淋巴瘤的病理类型而异，小淋巴细胞淋巴瘤与cll相同。其他淋巴瘤如弥漫性大b细胞淋巴瘤，肝脾γδ t细胞淋巴瘤，burkitt淋巴瘤，在外周血及骨髓中可见畸形瘤细胞，其免疫表型随淋巴瘤的类型而异。必须指出，白血病细胞的免疫抗原表达常随病程而有改变，有时难于判断，如有的免疫抗原表达可呈交*出现，或表达某一阶段不应表达的抗原，有时必须综合形态检查，甚至染色体检查结果，才能做出白血病类型的诊断。

    2.3  染色体检查  随着染色体检查方法的不断改进，从g带、q带、r带显色，到荧光原位杂交（fish）、多色fish，在淋巴系恶性增生性疾病中发现染色体异常越来越多。 

 （1）急性淋巴细胞白血病（all）： 染色体异常可高达92％，其中60％左右为特异性染色体重排。①染色体数目异常：  如二倍体、假二倍体、正常二倍体、亚二倍体／近单倍体；②染色体缺失： 如6q-、9q-、12p-等；③染色体结构异常、移位、重排：t细胞all常见t（11；14）（p13；q11）；t（10；14）（q24；q11）；t（1；14）（p33；q11）；t（10；14）（q24；q11）；t（1；14）（p33；q11）；t（8；14）（q24；q11）；t（11；14）（p15；q11）。染色体断裂点常累及t细胞受体基因a／δ、β和γ，40％～50％的移位累及tcra／δ和tcrβ。b细胞all 常见t（8；14）（q24；q32）；t（4；11）（q21；q23）；t（1；19）（q23；p13）；t（9；22）（q34；q11）；t（12；21）（p13；q22）；t（2；8）（p2；q24）［1］。

（2）慢性b细胞增生性疾病：其中cll染色体异常者，+12可发生在30％的患者，add（14）（q32）的发生率为20％，del／t（13q）为20％，del（11q）>10％，del（6q）为10％；幼淋细胞白血病50％可发生add（14）（q32）。毛细胞白血病20％有可发生add（14）（q32）；多发性骨髓瘤1q异常者占40％，浆细胞白血病70％有lp／lq异常，50％有add（14）（q32）。

（3）慢性t细胞增生性疾病：慢性t细胞白血病40％有4qll重排；慢性幼淋细胞白血病50％有此核型异常；成人t细胞白血病25％有del（6q），20％有add（14q）；sezary综合征30％有del／t（2p）。

（4）霍奇金淋巴瘤（hl）：染色体异常较非霍奇金淋巴瘤（nhl）少10倍。1／3的病人染色体l（缺失、移位、重复、异染色体1）。14q+（多数14q32）约见于20％的病例。t（11；14）及t（14；18）少见。15％的病人有6号染色体长臂长短不等、缺失。3q、7q、12p及13p异常较nhl多见，常见者为1、3、7、8及21号染色体数量上的改变。

（5）非霍奇金淋巴瘤（nhl）：约有80％的患者显示克隆性染色体异常。常见异常为add（14）（q32）；t（14；18）；t（8；14）；del（6q）；i（17）（q10）；+3；+7；+12；+18及+21。

    2.4  分子生物学检查  基因异常和突变是各种恶性肿瘤发病的根本原因。检测与恶性肿瘤发病相关的基因异常和突变，除细胞遗传学（染色体）检查外，分子生物学检查是重要和基础的手段。染色体异常所累及的基因，需要进一步用分子生物学技术予以弄清，这对进一步了解恶性肿瘤的发病机制、临床诊断和治疗起了很大的推动作用［12～15］。许多新的分子生物学检查方法，如rt-pcr（逆转录pcr）、real-time pcr（值时pcr）、长链pcr、变性梯度凝胶电泳、恒定变性凝胶电泳、毛细管电泳、可变数目串联重复序列、序列扫描、碱基切割、直接测序、芯片技术（dna、寡核苷酸、蛋白质）、飞行时间质谱分析等已用于临床诊断和研究。3  淋巴增生性疾病的治疗与预后

急性淋巴细胞白血病（all）与急性非淋巴细胞白血病（anll）的治疗方案不相同，急淋一般用含有激素、长春新碱、阿霉素或柔红霉素的治疗方案。门冬酰胺酶一般对all有效。b细胞型和t细胞型all的治疗方案虽无大的差别，但免疫表型、染色体的改变和有些基因的改变可影响疗效和预后。

淋巴结病理检查是正确诊断淋巴瘤类型必不少的手段，淋巴瘤侵袭骨髓及并发白血病时，骨髓象和血象中所见淋巴瘤细胞从形态、免疫表型、细胞遗传学及分子生物学检查所得的结果，对淋巴瘤的类型诊断十分重要，有时起关键性作用，尤其是不伴外周淋巴结肿大或结外病变的病例。

目前，尚不能根据t或b型淋巴瘤采用不同的治疗方案，经典方案仍是以chop为基础的联合化疗或放疗。中低度intil的有效率可达60％～80％。高度恶性的类型增加化疗药物，如bacop（博来霉素、阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、强的松）、cop-blam（cop+博来霉素、丙卡巴肼）、m-bacob（甲氨蝶呤、四氯叶酸、博来霉素、阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、地塞米松等）。低度恶性nhl可用核苷拟似类药物，如复达拉滨和2-cda等，有效率可达80％。hl用copp、mopp／abvd（阿霉素、博来霉素、氮烯咪胺、长春碱）治疗，80％的病人可获完全缓解，10年存活率可达60％。    淋巴增生性疾病的分类和诊断方法已有了很大的进展，使临床工作者对这些疾病的认识有了很大的提高，尤其是依据形态、免疫分型、染色体分析以及结合基因研究的深入，可望对淋巴增生性疾病的发病机制得到进一步的认识，研究开发更为有效的治疗药物。

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异型淋巴细胞范文第3篇

【摘要】 目的 探讨淋巴结肿大病因，提高淋巴结肿大准确诊断水平。方法 利用改良一次性5～10ml注射器(22G、7号注射器，外径＜0.7mm)，针吸取材、涂片、行改良瑞-姬双染技术，低倍镜查找特殊异常细胞，油镜仔细观察细胞形态结构特征，对于未见异常细胞要进行分类检查，对疑难标本，同时做结核抗体、抗酸菌染色、流式细胞仪、CD系列、基因、DNA异倍体、锌原卟啉(ZPP)、肿瘤标志物等检测指标。结果 结核性淋巴腺炎发病率最高，有546例(36.0%)，结核结节期为主，252例(46.2%)，淋巴结节期184例(33.7%)，其中早期结核性淋巴腺炎233例(44.7%)，转移癌次之有430例(28.3%)，其中以未分化癌为主，156例(32.3%)，腺癌132例(30.7%)，鳞癌114例(26.3%)，而慢性淋巴腺炎352例，占第三位，非霍奇金淋巴瘤98例(6.5%)，以B淋巴细胞型为主70例(71.4%)，T淋巴细胞型17例(17.3%)，NK细胞型11例(11.3%)，其中肿瘤较少见。结论 淋巴结针吸细胞病理学可做淋巴结肿大疾病早期诊断及鉴别诊断，并与预后转归密切相关，而且具有简单快速、经济实用、准确率高、便于推广等优点。

【关键词】 淋巴结针吸；细胞学；淋巴结；早期诊断；价值

【Abstract】 Objective To research lymph node swelling’s reasons and to improve the correct diagnosis level of lymph node swelling.Methods We use remedied disposable injector(5～10volume，22G，outer diameter ＜0.7mm) to materials smear，and dyed the smear with improved Wright-Giemsa Method.Particular abnormal cells were searched under low-multiplying microscope and cell’s structure characteristics were observed carefully under oil lens.Classification examination was put into practice for only normal cells observed.For the dubious specimen，tuberculosis-Ab，acid-fast bacteria staining，flow cytometry，CD series，gene，DNA aneuploidy，ZPP and tumor markers etc were detected.Results Tuberculosis lymph gland inflammation coverd highest rate：546 cases (36%) in which tuberculosis node was 252 cases (46.2%)，lymphonode period was 184 cases (33.7%)，early tuberculosis lymphagland inflammation was 233 cases (44.7%).Metastasis cancer followed it：430 cases (28.3%) in which undivided cancer was 156 cases (32.3%)，glandular cancer 132 cases (30.7%)，epithelial cancer 114 cases (26.3%)， chronic lymph glandular inflammation was 352 cases，Non-Hodgkin’s lymph-tumor 98 cases (6.5%) in which B lymphocyte type covered 70 cases (71.4%)，T lymphocyte covered 17 cases (17.3%)，NK cells type covered 11 cases (11.3%) tumor were sacrce.Conclusion Lymph node needle aspiration pathology can diagnose and differentiate lymph node swelling diseases.And it’s closely correlated with prognosis and recovery.It’s simple，prompt，economic and practical.It’s exact rates are high and it’s convenient to spread it.

【Key words】 lymph node needle aspirate；cytology；lymph node swelling；early diagnosis； value

为了探讨淋巴结肿大病因，提高淋巴结肿大准确诊断水平，笔者收集本院2003～2004年淋巴结肿大或肿块1518例患者利用改良一次性5～10ml注射器，针吸取材，涂片，行改良瑞-姬双染技术，效果较好，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集我院2003～2004年淋巴结肿大或肿块1518例病人，男725例(47.7%)，女793例(42.3%)，年龄2个月～84岁，平均35.4岁，均按国际间淋巴结疾病诊断标准。

1.2 方法 选择淋巴结肿大有意义部位，严格消毒，用一次性塑料5～10ml注射器(22G，5～7号针头，外径＜0.7mm)，左手固定肿物，右手持针刺入皮内，再穿入肿大淋巴结各部位，抽吸其细胞液，涂片、干后，用瑞-姬双染技术，晾干，先用低倍镜仔细查找特殊异常细胞，再用油镜认真观察细胞形态结构特征，根据细胞形态结构的特征，并结合临床体征，以及某些相关检测指标，如结核抗体、CD系列、微核、锌原卟啉(ZPP)、基因、DNA异倍体、抗酸菌及霉菌染色和肿瘤标志物等检查后，综合分析，做出及时准确报告。对无明显异常标本要做淋巴结细胞学分类检查。

2 结果

详见表1、表2、表3、表4。

表1 126例恶性淋巴瘤发病率比较

表2 淋巴结炎症及瘤样变发病率比较(995例)

表3 淋巴结转移癌肿发病率比较(430例)

表4 1518例淋巴结肿大疾病发病率比较

结果表明，结核性淋巴结炎发病率最高546例(36%)，其中以结核结节期252例(46.2%)为首位，淋巴结节期次之184例(33.7%)，炎性增殖期49例，约占9.0%，结核早期有233例(42.7%)，干酪样脓样坏死期仅有56例(10.3%)；慢性淋巴结炎(病毒感染)发病率占第2位，有342例(36.6%)，其他炎症如坏死性淋巴腺炎、增生性淋巴腺炎、猫抓性淋巴腺炎较少见；癌肿以转移癌为主有480例(28.3%)，未分化癌156例(36.3%)，腺癌132例(30.7%)，鳞癌114例(26.6%)，腺鳞癌22例(5.1%)，其他肿瘤6例(1.3%)。在淋巴结原发肿瘤中，非霍奇金淋巴瘤最多98例(77.8%)，以B淋巴细胞型有70例(71.4%)为主，其中中心细胞/中心母细胞型为主38例，占38.8%，T淋巴细胞型有17例(17.4%)，以大细胞间变细胞为主47.1%，NK细胞型仅有11例(11.2%)；霍奇金淋巴瘤有28例(22.2%)，以淋巴细胞为主型及混合型居多，分别占35.7%、32.1%。

3 讨论

3.1 正常淋巴结大小、形状、分布 淋巴结黄色、肾形、球型小体，全身有500～600个，重量1000g，0.1～0.3cm，不能触及，如＞0.75cm为病理性肿大。淋巴结肿大根据深浅部位分2种，一种表浅淋巴结肿大(颈部、锁骨、腋下、腹股沟)；另一种深部淋巴结肿大，组织器官及脏器间质中［1～3］。

3.2 浅表淋巴结肿大与疾病关系 (1)颌下淋巴结肿大，提示口腔、面部、鼻咽部病变；(2)颈部淋巴结肿大，提示鼻咽部、肺部、黑色素瘤、腮腺、甲状腺病变；(3)锁骨左侧淋巴结肿大，多见胃、结肠、肺、乳腺、左下半身如泌尿道、生殖器等病变；右侧淋巴结肿大，多见食管、乳腺病变；(4)腋窝淋巴结肿大，多见乳腺等病变；(5)腹股沟淋巴结肿大，多见生殖器(宫颈、卵巢、、阴道)、泌尿系统(膀胱、肾脏、输尿管、结肠等部位病变。

3.3 肿大部位选择 (1)多处淋巴结肿大，首选锁骨，其次颈部，再次之腋窝，最后腹股沟；(2)有大、小淋巴结肿大，选择大淋巴结有价值；(3)淋巴结肿大时间，怀疑肿瘤，首先选择近期新肿大淋巴结，如怀疑结核应选择陈旧淋巴结价值大；(4)有活动和粘连肿大淋巴结，应选择粘连部位肿大淋巴结意义较大；(5)治疗前后淋巴结肿大，应选择治疗前肿大淋巴结较好，有溃疡淋巴结最好不做首选部位，避免假阳性反应；(6)穿刺过淋巴结，最好1个月内不做针吸细胞病理学检查诊断［1～3］。

3.4 淋巴结针吸细胞病理学诊断价值 淋巴结肿大原因众多，有些淋巴结肿大是疾病原发病因，如恶性淋巴瘤、结核性淋巴腺炎及各种淋巴结炎及淋巴结病变等。有些淋巴结肿大属于继发原因，如转移癌肿、血液病、黑色素瘤、寄生虫、代谢异常病、免疫、过敏、药物、中毒等多种原因。文献记载淋巴结肿大约占整个临床体征36.5%～90%不等，由此可见淋巴结针吸细胞病理学是非常重要的［1～4］。该项新技术具有创伤小、定位准确、安全可靠、经济实用、简单快速、准确率高等优点，深受欢迎，便于推广。特别对结核性淋巴腺炎，可免遭手术切除做病理引起伤口不愈合及瘘道形成的痛苦，有时淋巴结是免疫活性细胞产生重要场所，切除做组织学病理学检测会导致免疫功能损伤。因此针吸细胞病理学检验诊断是最好的选择［1～5，9］。

3.5 淋巴结针吸细胞病理学可做疾病早期诊断［1～3］

3.5.1 淋巴结核分型诊断提高结核性淋巴结炎早期诊断 早期发现、早期治疗是提高淋巴结肿大疾病治疗疗效高的重要手段［1，10］。淋巴结传统经典诊断方法，依靠切除淋巴结后做病理组织学诊断，根据有否结核结节、干酪样坏死、结核球等病理结构做诊断。本文经数十年众多病人研究发现，结核性淋巴腺炎早期阶段，机体受到结核杆菌侵袭，引起淋巴结免疫活性细胞增殖性反应，淋巴结结构完整，仅有原、幼淋巴细胞，组织细胞，免疫母细胞及激活淋巴细胞增生反应，我们称为［8～11］(1)“增生性结核炎性反应期(Ⅰ期)”，仔细查找可在增生淋巴细胞之间有典型类上皮细胞出现，称“淋巴间类细胞群”，为早期结核。淋巴结炎特殊细胞形态结构。本文49例，占9.7%，通过结核抗体及PCR、PPD及临床随诊得到证实，最终得到明确诊断，积极治疗病人很快痊愈；(2)淋巴结节期(Ⅱ期)，又称结核初期阶段，细胞在增生淋巴结中，可看到较多组织细胞与淋巴细胞聚合-形成淋巴结节，仔细查找可见少数类上皮细胞及“淋巴间类细胞群”，本文有184例(33.7%，该期结核抗体(+)、ADA(+)、PPD(+)，抗结核治疗好，该二期均为结核早期阶段，以往经典传统诊断方法是无法诊断的，遭致漏诊、误诊，延误治疗。本文有223例(46.7%)结核性淋巴腺炎在非典型期，利用新结核分型诊断标准，使之明确诊断。及时得到治疗；(3)结核结节期Ⅲ期，又称结核中期，该期具有典型结核特征，本文有307例(56.3%)，该期真正能找到典型郎罕氏细胞仅占8.6%，大多数为类上皮样细胞与淋巴细胞聚合形成结核结节。如果以能否找到郎罕氏细胞为诊断依据，大多数病例被漏诊。(4)干酪样脓样坏死期(Ⅳ期)，又称冷脓肿，该期最大特点，淋巴结往往被破坏，坏死组织及破碎细胞碎屑充占整个视野，如发生冷脓肿，可见少数退化中性粒细胞残核，此期其经典干酪样坏死仅占5.6%，大多数干酪样坏死即伴发细菌感染，形成冷脓肿，此期仔细查找有否退化类上皮细胞残核碎影及“潜隐退化结核结节”很重要，该期做抗酸菌染色检测其阳性率高达90.3%以上，能查到结核杆菌。但结核抗体有时呈阴性反应，因此不能以结核抗体及PPD做结核性淋巴腺炎确切诊断依据。(5)结核性纤维素增殖期(Ⅴ期)，又称结核恢复期。涂片可见到大量条丝状或条状纤维组织，纤维细胞和黏液、网状纤维、间质及肉芽组织增生。本文有5例(0.9%)。

凡是怀疑结核所有病例均做结核抗体、PPD、ADA、PCR等检验指标，结核抗体阳性率仅在56.8%～78.2%，就是在典型结核结节期、干酪样坏死期，甚至查到大量结核杆菌，而结核抗体却呈阴性反应。相反有的接种卡介苗有假阳性反应，因此仅靠结核抗体及其他如PPD、OT、ADA等项检查做结核性淋巴结炎诊断指标，其误诊率、错诊率非常高。这与结核杆菌L型变异及机体免疫机能应答反应失调有关［5～7，9］。

3.5.2 慢性淋巴结炎 又称病毒性淋巴结炎，与细菌性淋巴结炎本质不同，必须及时选用抗病毒类药物治疗才有效。但我们经过数十年研究观察，慢性淋巴结炎针吸细胞病理学突出特征，以成熟淋巴细胞为主，原、幼淋巴细胞＜5%～10%，组织细胞、浆细胞、少数激活淋巴细胞、激活单核细胞、结核抗体阴性，缺乏中性粒细胞。本文342例(36.6%)，仅次于结核性淋巴结炎，而临床医生一看到慢性淋巴腺炎报告，或有些病例发现淋巴结肿大不分青红皂白，一律用抗细菌治疗，从未考虑病毒感染，使较多病人延误治疗，增加病人痛苦及加重经济负担。为此，笔者再次呼吁临床医生发现淋巴结肿大病人，一定要先做针吸细胞病理学检查，确诊后按疾病性质进行针对性治疗；慢性淋巴腺炎是病毒感染，应首先抗病毒治疗2周，千万不要乱用抗菌药治疗。

3.5.3 坏死性淋巴腺炎 又称亚急性淋巴腺炎［12］，该病最大特点：临床高热、疼痛、白细胞减少、淋巴结肿大、抗菌药治疗无效，而激素有效为特点。细胞学特征，淋巴细胞增生，伴原、幼淋巴细胞、组织细胞、免疫母细胞增生，局灶性坏死，找到特有浆细胞样单核细胞、缺乏中性粒细胞为特征。

3.5.4 恶性淋巴瘤诊断 淋巴结以原、幼淋巴细胞或浆细胞或组织细胞恶性增生为主，通常在60%～95%以上，瘤细胞弥散分布，形态结构异常，及异常核分裂，根据增生细胞种类和特殊异常细胞出现，再结合CD系列如CD34、CD30、CD38、CD3、CD7、CD10、CD19、CD20、CD56、CD16进行免疫分型，报告之，比如，Burkitt淋巴瘤，瘤细胞核浆有蜂窝状、星空状空泡；中心母细胞型淋巴瘤，核圆，无切迹，呈无裂型；而中心细胞型有缺口、疝出，呈有裂型；免疫母细胞型，细胞体积大，核大，染色质颗粒状，胞浆偏碱；大细胞间变型，细胞体积大，形态不规则，有畸形；浆细胞型，有病理型浆细胞增生＞50%以上，体积大，核染色质疏松，有核仁，胞浆深蓝、紫红色，无淡染区，可见双核、多核、异型核浆细胞。又如恶性组织细胞病，细胞体积大，大小不等，畸形怪状，核有畸形，核仁大，胞浆含有颗粒，POX(-)，ALP(-)、CD30(-)、CD56(+)、CD16(+)；再如霍奇金淋巴瘤，组织细胞与淋巴细胞同时恶性增生，伴浆细胞、嗜酸性细胞、单核细胞、中性粒细胞，细胞五花八门，多种细胞混合为背景，找到典型的有诊断价值R-S细胞、双核镜影核或多核、畸形核细胞，还有单个核，核仁巨大，核畸形的Hodgkins细胞为诊断依据［13～15］。

3.5.5 转移癌 淋巴结转移恶性肿瘤最常见，本文(1)未分化癌(大细胞型、小细胞型、梭形、混合型)有156例(36.2%)，小细胞型为主(51.3%)，其特点细胞大小不一，大细胞型15～60μm，小细胞型＜15μm，最大特点为核大、浆少，多呈裸核，呈三角形、瓜子形、麦粒状、圆形、梭形，核仁大，散在或成堆呈站队或镶嵌状结构。(2)腺癌，以低分化腺癌居多，占转移癌21.6%，占腺癌70.5%，腺癌细胞最大特点细胞成堆或散在分布，呈状、腺腔状、梅花状、葡萄状排列，胞浆有黏液空泡为特点。(3)鳞状细胞癌，以低分化为主，占转移癌15.1%，占鳞癌57%，浆少，缺乏角化蛋白、角化珠；高分化鳞癌有纤维形、蝌蚪状、蛇形、圆形，有典型的角化珠、角化蛋白。(4)腺鳞癌，同一张涂片具有鳞癌细胞角化珠、角化蛋白特征，部分癌细胞又伴有核偏位、胞浆有黏液空泡，呈状、腺腔状、葡萄状、戒指状结构的腺癌特征。

3.5.6 其他转移肉瘤细胞 肉瘤细胞呈弥漫散在分布，大小不一，有畸形，核仁大，并看到浆质体为特征，比如胞浆有黑色素颗粒存在，提示黑色素肉瘤；恶性胸腺瘤，可见上皮样、梭形、巨多核瘤细胞，伴淋巴细胞增生为特点。

总之，在针吸细胞病理学检验诊断中，一方面要抓住临床重要体征，另一方面要熟练掌握细胞形态结构特征，还要配合细胞背景及特殊检验指标，综合分析作出诊断［16，17］。能够明确诊断的，一定要确切，决不含糊；不够典型的，一定要跟踪随诊，并做一些相关的检查，决不能草草了事，轻率作出诊断。 【参考文献】

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异型淋巴细胞范文第4篇

[关键词]组织细胞性坏死淋巴结炎; 病理特征; 鉴别诊断

[中图分类号] R632.6[文献标识码]A [文章编号] 1005-0515（2010）-10-001-01

组织细胞性淋巴结炎(HNL)是一种病因不明的非肿瘤性，非特异性淋巴结肿大的自限性免疫性疾病，属于淋巴结反应性增生性病变。临床上多持续高热，颈部及多部位淋巴结肿大，外周血象白细胞数下降，血沉加快。组织学上显示大量的组织细胞、T淋巴细胞增生活跃，可见异型性及核分裂。临床及组织形态学极易与恶性淋巴瘤混淆，误诊率高达40%（1）。本文通过对7例NHL患者的临床病理资料及免疫组织化学检查结果进行分析，并探讨该病的临床病例特征、诊断及诊断要点，以提高对该病的认识。

1 资料及方法

1.1收集我院2006-2010年经病理诊断为组织细胞性坏死性淋巴结炎7例，男性1例，女性6例，年龄21-56岁，其中5例单侧或双侧颈部淋巴结肿大，2例颈部、颌、腋窝、腹股沟多部淋巴结。肿大淋巴结直径1.5--4厘米，活动无粘连，伴发热，多数患者发病前类似感冒症状，给予抗生素治疗无明显减轻。行淋巴结1-2枚活检，均经10%的福尔马林固定，石蜡包埋制片，HE染色。所有病例均有上级医生会诊，并结合免疫组织化学进行检查。

1.2 HNL组织学上分为三型：1.增生型病变主要为新生的组织细胞、少量免疫母细胞、T细胞增生，组织细胞吞噬细胞碎片，坏死不明显。2.坏死型有较明显的凝固性坏死，大片的楔形坏死与增生吞噬现象并存。3.黄色瘤样型组织细胞呈泡沫状的黄色瘤样细胞。[4]

1.3 病理学检查结果：活检淋巴结1-2枚，肉眼观察，送检淋巴结多为破碎状，部分完整，切面灰红、灰黄色，质软，部分呈鱼肉样。镜下见大部分淋巴结结构被破坏，皮质、副皮质区散在大小不等，程度不一的坏死灶，坏死灶内大量的吞噬核碎片的组织细胞及淋巴细胞增生，坏死灶周边为见大量增生组织细胞、免疫母细胞、浆样单核细胞，坏死区及周围无中性粒细胞浸润，部分病例可见残存的淋巴滤泡，病灶内缺乏中性粒细胞核浆细胞浸润。[1]

1.4 免疫组织化学结果：淋巴细胞以CD45RO阳性及表达CD68的组织细胞为主。[2]

2 讨论

HNL 是一种病因不明的非肿瘤性，非特异性的自限性免疫性疾病，好发于中国及日本和等亚洲国家，多见于中青年患者。临床表现为持续高热，颈部淋巴结肿大，有压痛，外周白细胞下降，血沉加快，对抗生素治疗效果不佳，临床易误诊为恶性淋巴瘤。本病的发病机制可能与病毒（EBV）、人T淋巴细胞病毒及巨细胞病毒等病毒感染诱发局部高效反应及自身免疫相关。[3]

本组7例患者中淋巴结活检多不完整，其中5例呈破碎状。镜下HNL组织形态变化多样，但淋巴结内多灶性病变、吞噬凋亡小体或核碎片的组织细胞，转化增生的T淋巴细胞及缺乏中性粒细胞浸润是HNL的三大病理特征[7]。Kuo与1995年根据病理组织学特点将HNL分为增生型，、坏死型及黄色瘤样型。[4]本文7例患者中 属于细胞增生型3例，坏死碎片型3例，黄色瘤样型1例，前两型之间互相存在，只是细胞增生或坏死碎片所占比例不同。临床上的三个分期反应了镜下所见三种分型的特点，由于HNL得临床表现和镜下特点的多样性，常误诊为恶性淋巴瘤、猫抓病、结核及转移癌等。因此，必须同以上疾病鉴别。（1）HNL早期增生型最诊断困难，易于非霍奇金淋巴瘤相混淆。早期增生型坏死不明显，病变区间多个病灶相融合占据淋巴结大部，病变区淋巴窦消失。病变区组织细胞增生活跃，其核可有异型性，组织细胞间散在分布或灶状分布异性的免疫母细胞，浆样T细胞。临床表现发热、抗炎治疗无效。因常被误诊为T或B细胞淋巴瘤。非霍奇金淋巴瘤淋巴结构消失，组成细胞较单一，少见组织细胞吞噬现象，免疫组织化学标记组织细胞阳性，T或B细标记阳性为主，淋巴细胞弥漫性增生浸润。只要掌握HNL临床病理及免疫组织化学特征，是可以做出正确诊断的。（2）HNL坏死期应于猫抓病鉴别，此病淋巴结也有坏死灶。但淋巴结为化脓性性坏死灶。有大量的中性粒细胞浸润，用抗菌素有效，结合病史可以作出诊断。（3）与结核病鉴别，结核病是凝固性坏死，少见组织细胞吞噬碎屑。（4）转移癌病变淋巴结为血性坏死，缺乏核碎片，核有明显异型，为浸润的恶性组织细胞。本文2例最初诊断为恶性组织细胞增生症，后经会诊证实为HNL，因此对于该类病变的活检应多做切片，仔细观察，结合免疫组织化学进行检查。

参考文献

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异型淋巴细胞范文第5篇

作者：彭磊　王臻　王庆良　王鹏飞　胡蕴玉　吴银松

【关键词】 骨肉瘤

关键词: 骨肉瘤;T淋巴细胞，细胞毒性;体外扩增

摘 要:目的 研究骨肉瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）体外扩增培养的方法，并进行细胞毒检测. 方法 抽取骨肉瘤患者自身的外周血，分离淋巴细胞，用IL-2体外短期刺激方法提高对骨肉瘤细胞的免疫性，再按一定比例体外与多西紫杉醇处理的骨肉瘤细胞及巨噬细胞混合培养（MTLC）可获得骨肉瘤的特异性CTL细胞，进行鉴定并观察其杀伤特性. 结果 混合培养4d后，即可扩增出大量淋巴细胞，流式细胞仪证实主要是CD8+ 细胞，这些具有杀伤活性的CTL细胞体外对自身肿瘤细胞有很强的细胞毒作用. 结论 在IL-2作用下，应用巨噬细胞、自体肿瘤细胞及淋巴细胞体外混合培养，是体外扩增特异性细胞毒性T淋巴细胞的较好方法，CTL作为新的特异性免疫治疗方法有望提高骨肉瘤的免疫治疗效果.

Keywords:osteosarcoma;CTL;proliferation in vitro

Abstract:AIM To induce the osteosarcoma specific CTL proliferation in vitro.METHODS We isolated T lympho-cytes from peripheral blood of osteosarcoma cases，which were previously dealt with docitaxol，and activated with com-bination of macrophages and interleukin-2（IL-2），then their tumor-killing ability was measured.RESULTS A large number of lymphocytes that proliferated after3d mixed cul-com ture were proved mainly to be CD8+ T cell by FCM，and their tumor-killing ability was great in vitro.CONCLUSION The specific CTL proliferation in vitro by mixed culture of macrophages，host tumor cells and lymphocytes under the presence of IL-2is a prospective way in the immunological therapy of tumor.It may improve the therapeutic effect of osteosarcoma.

0 引言

免疫治疗是恶性肿瘤治疗的重要辅助方法，已确认机体免疫监视功能中起重要作用的是细胞免疫，其中起特异性杀伤作用的是细胞毒T淋巴细胞（CTL），CTL具有特异性高、杀伤性强等特点，故有重要的临床应用前景，成为新的研究热点，但此研究在骨恶性肿瘤尚属起步阶段.我们应用自建系的骨肉瘤细胞系PL-992与患者自身淋巴细胞及巨噬细胞体外混合培养（MTLC），扩增出大量淋巴细胞，并对这些淋巴细胞进行生物学特性测定.

1 材料和方法

1.1 骨肉瘤细胞系PL991来源及预处理 手术无菌切除新鲜活力好的骨肉瘤组织，病理诊断为骨肉瘤骨母细胞型，接种裸鼠皮下，待肿瘤长出后，组织块培养法，体外传代建系并进行生物学特性测定.用6mg L-1 多西紫杉醇处理48h后与淋巴细胞体外混合培养.

1.2 自体淋巴细胞的分离 抽取骨肉瘤患者外周血4mL，淋巴细胞分离液（购于Sigma公司）1500g离心15min，分离淋巴细胞（1×106 ），培养于200mL L-1 小牛血清RPMI1640的完全培养液中.

1.3 特异性杀伤性T淋巴细胞的体外刺激诱导 用班蟊液获得患者自体的巨噬细胞加入用IL-2（上海华新生物高技术公司）150U mL-1 ，植物血凝素预刺激36h的淋巴细胞，同时加入1/8的多西紫杉醇处理的骨肉瘤细胞PL-991，37℃50mL L-1 CO2 条件下培养，细胞计数，并在倒置显微镜下观察.

1.4 流式细胞仪增殖T淋巴细胞检测 取2×106 mL-1 待测细胞加入U型孔内，再加入CD3+ CD4+ CD8+ 单抗，每孔各20μg，4℃孵育30min，应用免疫荧光和流式细胞仪测定淋巴细胞CD3+ +CD4+ +CD8+ 表型.

1.5 细胞毒活性检测 采用51 Cr释放法，取对数生长期的PL-992骨肉瘤细胞为靶细胞，密度为107 mL-1 ，加入（51 Cr）Na2 CrO3 70kBq mL-1 ，37℃孵育1h，PBS洗涤2遍后，按104 /孔加入96孔板，按不同的效靶比加入T细胞，培育4h后收集上清液作γ计数，自然释放孔为仅加入靶细胞，最大释放孔为靶细胞加入100μL NP40.

细胞毒计算公式为:细胞毒活性=（实验孔CMP-自然孔CMP）/（最大释放孔CMP-自然孔CMP）×100%.实验孔均设三复孔.

2 结果

2.1 形态学观察 应用倒置显微镜观察，细胞体积明显变大，共孵后体积增大2～3倍，呈圆形、多边形、新月形、三角形等多种不规则形态，以肿瘤细胞为中心，形成特异性淋巴细胞增值克隆，在倒置显微镜下呈葡萄状排列，并且细胞数量逐渐增多，4d后细胞串开始脱落，肿瘤细胞已经发生凋亡（Fig1）.

图1 诱导前后CTL细胞形态，诱导后细胞多样并可见肿瘤细胞的凋亡　略

2.2 细胞生长曲线 淋巴细胞加入肿瘤细胞后生长迅速，继而细胞数量迅速增加由1.6×106 增至第5日1.5×107 （Fig2）.

图2 CTL细胞增殖迅速　略

2.3 流式细胞仪测定 淋巴细胞CD4+ （17.0±1.1）%，CD8+ 占（76.0±5.3）%，CD3+ 占（84.0±2.4）%，CD8+ CD3+ 占（67.0±2.1）%证实为特异性淋巴细胞为主.

2.4 特异性杀伤性T淋巴细胞细胞毒活性 诱导出的CTL对自体骨肉瘤细胞的细胞毒活性，培养诱导的细胞毒性T淋巴细胞对自体骨肉瘤细胞的杀伤活性为84.3%与未诱导的T淋巴细胞有显著性差异（P

3 讨论

体外诱导肿瘤特异性CTL并作为新的过继性免疫治疗的活性细胞已成为近年来肿瘤治疗研究中的一个新的热点，特别是由CTL筛选肿瘤的特异性抗原作为肿瘤疫苗有广阔的应用前景，与黑色素瘤等免疫原性肿瘤不同，骨肉瘤的特异性抗原至今仍难定义［1］ ，因此设想直接用处理的肿瘤细胞刺激诱导CTL较为困难，但是国外有应用树突状细胞刺激诱导出肿瘤特异性CTL细胞的研究基础，巨噬细胞也同属于肿瘤抗原提呈细胞，对肿瘤抗原有一定的提呈功能.另外，活化巨噬细胞分泌多种因子，有利于淋巴细胞识别肿瘤抗原，MHC I，II抗原表达增强，膜表面TNF IL-1，IL-7表达增强［2，3］ .体内实验也证明，杀伤肿瘤细胞时巨噬细胞的浸润要早于T淋巴细胞，在肿瘤原位也找不到活化迹象，在引流淋巴结处T细胞有明显的活化，增殖巨噬细胞处理抗原，提呈抗原，导致肿瘤特异性T细胞活化［4-6］ .因此，我们采用巨噬细胞，处理的肿瘤细胞以及淋巴细胞体外混合培养，借助这两方面的理论基础，设想在体外模拟T细胞特异性激活的过程，诱导特异性的CTL.我们发现，应用巨噬细胞体外刺激淋巴细胞，T淋巴细胞体外扩增的速度明显快于既往作者的扩增速度，巨噬细胞提取方法简便宜行，使用价值较大［7-9］ .另外，我们还发现共孵后巨噬细胞的吞噬功能明显增强（另文报道），说明体内巨噬细胞与淋巴细胞有协同作用.

图3 略

总之，巨噬细胞与淋巴细胞共培养是一种较好的体外扩增特异性T淋巴细胞的方法，对于研究体内特异性淋巴细胞的转归及机制有重要价值，同时也说明了骨肉瘤的抗原性较强，肿瘤特异性淋巴细胞体外 回输的方法具有杀伤性强，特异性高等特点，有望提高骨肉瘤免疫治疗的结果，故有着重要的临床应用前景，值得深入研究.

参考文献

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