【摘要】目的探索黄芩的新型提取方法。方法采用紫外分光光度法测定黄芩苷含量，比较水提法与液-液连续萃取法对黄芩苷提取率的差别。结果水提法与液-液连续萃取法对黄芩苷提取率差异有显著性。结论液-液连续萃取法是一种新型高效提取方法。

【关键词】黄芩；液-液连续萃取法

【Abstract】ObjectiveTostudyanewextractionmethodforbaicalininradixscutellariae.MethodsUltravioletspectrophotometrymethodwasusedtodeterminethecontentofbaicalin.Theabstractionrateofbaicalinbywaterextractionwascomparedtothatofliquid-liquidcontinuousextractionmethod.ResultsTherewasasignificantdifferencebetweenthetwomethods.ConclusionTheliquid-liquidcontinuousextractionmethodisanewandhighefficiencyseparationmethod.

【Keywords】RadixScutellariae;liquid-liquidcontinuousextractionmethod

黄芩（RadixScutellariaebaicalensis）为唇形科植物黄芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根。具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎之功，用于发热烦躁、肺热咳嗽、泻痢热淋、湿热黄疸、胎动不安、痈肿疮毒等症［1］。主要有效成分是黄酮类：黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩苷、汉黄芩素等。黄芩根中含有黄芩酶，能够促进黄芩苷和汉黄芩苷水解，生成黄芩黄素和汉黄芩黄素，黄芩黄素分子中带有三个邻位的酚羟基，性质不稳定，容易被氧化转为醌类衍生物，质量随之降低［2］。目前黄芩提取方法有水提取酸沉淀法、超声法、超滤法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等，而常用的为水提取酸沉淀法，但水提取存在黄芩有效成分提取不完全、提取出的杂质较多等缺点，因此本文采用液-液双向萃取法提取黄芩有效成分［3］，并与常用的水提法进行比较。

1仪器与试剂

1.1仪器PHS-3C精密pH计（上海雷磁仪器厂）；旋转蒸发器RE-52A（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-Ⅲ型循环水真空泵（河南省巩义适英峪仪器厂）；UV1700（日本岛津）；BS2245电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；紫外分析仪；超声清洗仪。

1.2试药黄芩苷标准品（中国生物制品检定所）；无水乙醇、磷酸、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、盐酸、醋酸、95%乙醇均为分析纯，黄芩药材经兰州大学药学院生药研究所马志刚教授鉴定为唇形科植物黄芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根，粉碎过60目筛；磷酸盐缓冲液自配（以磷酸溶液及磷酸氢二钠溶液配制pH值为2、3、4、5、6、7的磷酸缓冲液）。

2方法与结果

2.1黄芩苷标准曲线绘制［4］精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品10.29mg，加70%乙醇超声溶解，定容于50ml容量瓶中。精密量取黄芩苷对照品液（0.2058mg/ml）0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml分别置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L盐酸，再加70%乙醇至刻度，摇匀。于276nm波长处测定吸收度，随行试剂空白。以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标绘制标准曲线。回归方程为：Y=0.0551X-0.0021,R2=0.9993（n=6），黄芩苷在4.116～24.696mg/L范围内具有良好的线性关系。见图1。

2.2提取方法

2.2.1液-液双向萃取［3］精密称取黄芩药材粉末约5g，以煮沸的pH=2的磷酸缓冲液30ml烫过，冷却至38℃左右接入液-液双向萃取仪中（即图2中a瓶）。从回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3处，a瓶浸入38℃左右的油浴中，b瓶进行加热搅拌，使乙酸乙酯形成回流。回流提取4h后收集乙酸乙酯液，于旋转蒸发仪上回收乙酸乙酯，药材提取物备用，同法提取6组。见图2。

2.2.2普通方法提取精密称取黄芩药材粉末约5g，提取3次，第一次以10倍量沸水烫过煎煮2h，第二、三次分别加8倍量水进行煎煮，每次1h，合并煎液，滤过，滤液加2mol/L盐酸（80℃）调节pH值至2保温1h，静置24h，滤取沉淀，用水洗至pH5.0，继用70%乙醇洗涤至pH7.0，低温干燥，即得，同法提取6组。2.3样品测定于样品提取物中加入少量70%乙醇微热使溶解，转入100ml容量瓶中，超声溶解30min，以70%乙醇定容，滤过，弃去初滤液，精密吸取5.0ml续滤液以70%乙醇定容于50ml量瓶中,精密吸取1.0ml置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L盐酸，再加70%乙醇至刻度，摇匀。于276nm波长处测定吸光度。

2.4薄层检视黄芩苷对照品的70%乙醇溶液作为对照品溶液、黄芩液-液双向萃取样品提取物及普通方法样品提取物的70%乙醇溶液作为供试品溶液，照薄层色谱法试验，以毛细管吸取上述溶液，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。

2.5提取物含量比较所得含量为每克黄芩药物中所含的黄芩苷的毫克数。Levene方差齐性检验F=4.794，P=0.053>0.05，可认为两总体方差相等。取t=-8.148，df=10，P=0.000<0.05，可认为普通提取与液-液双向萃取所得m提/m药之间差异有显著性。见表1。表1两种提取方法提取黄芩苷的含量对比

2.6薄层检视结果薄层检视显示两种方法提取物的供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。

3讨论

由上述结果可以看出笔者所采用的新提取方法液-液双向萃取法所提取的提取物具有黄酮的特征反应，薄层检视也说明此法可提取出黄芩苷等黄酮类化合物，经SPSS分析可知两种提取方法的差异有显著性，即液-液双向萃取法所得黄芩中总黄酮的含量远高于通常采用的水提法，可作为一种高效的黄芩有效成分提取的新方法。

【参考文献】

1陈柏君.高山林.余国奠.黄芩及其同属药用植物研究进展.中国野生植物资源,2003，18（3）:20-24.

2孙秀英.中药黄芩的研究概况.中医药信息,1993，5:32-34.

3贺殿，吴勇杰，贾忠，等.液-液连续萃取方法及装置：中国，200410073368.7［P］,2005-08-24.

4黄启华.紫外分光光度法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量.中成药,2000,22（12）:836.