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补肾中药

补肾中药

补肾中药范文第1篇

吃中药补肾期间尽量的戒烟酒,戒不了也要尽量的减少,以免对肾脏引起更大的损伤,得不偿失。

吃中药补肾期间要少吃寒凉的食物,如冷饮、凉水、螃蟹等,另外也要少吃刺激性的食物,如辣椒、胡椒、大蒜等,以免引起要晓得降低。

吃中药期间尽量不要熬夜,早睡早起,保证充足的睡眠,白天也不要做剧烈运动,还是要多休息。

要过感冒或是有别的疾病,可以先不吃中药补肾,以免降低药性,或是引起身体的其它损伤。

(来源:文章屋网 )

补肾中药范文第2篇

【关键词】中药滋补肝肾法;治疗;卵巢囊肿

作者单位:535400广西灵山县中医医院卵巢囊肿为妇科常见病,其多发于20~50岁妇女,其主要发病原因为体内内分泌失调所致。主要症状有盆腔囊性包块进行性增大,下腹胀痛常伴有牵痛,月经混乱主要表现为闭经或经血淋漓有尽。目前西医治疗主要以手术为主,但术后复发率极高,给患者带来很大的精神压力和经济负担。本人在2009年5月至2011年6月间,采用中药治疗卵巢囊肿122例,疗新途径明显。现将治疗情况报告如下。

1临床资料

122例患难者均有盆腔囊性包块进行性增大,下腹胀痛常伴有牵痛症状,53例有月经混乱症状,有28例是因子宫肌瘤行全子宫切除术后患者,妇科检查附件区均触及包块,B超检查卵巢囊性肿块,大小于5×4×4 cm至8×8×9 cm之间,有部分内容物较混浊,舌质暗红,边有齿痕,脉沉。辨证为肝肾阴虚夹杂脾虚,病程有1个月至3年,年龄20~50岁,平均为28岁。

2治疗方法

辨证为肝肾阴虚夹杂脾虚证,治则为滋补肝肾为主,佐以健脾益气,方药组成:菟丝子20 g,山萸10 g,熟地10 g,女贞子12 g,旱莲草12 g,黄精10 g,当归10 g,枸杞10 g,麦冬10 g,桑葚子10 g,白芍15 g,黄芪15 g,淮山12 g,甘草6 g。以上药小煎2次,取汁400 ml,每日分三次服,连服3月,月经期间停服。

3治疗效果

3.1疗效标准治疗3个月后B超复查,卵巢囊肿消失,腹痛症状消失,月经恢复正常为治愈;卵巢囊肿缩小,腹痛症状消失,月经恢复正常为好转;卵巢囊肿无明显改变,症状未消失为无效[1]。

3.2治疗结果治愈83例,好转18例,未愈11例,总有效率81.9%。

4体会

中医将卵巢囊肿列为瘕中瘕的范畴,痞满无形时聚时散,推揉转动,其病属气分,病位在胞宫胞脉。中医传统上治疗卵巢囊肿多予活血破瘀行气散结为主,往往效果不佳。中医认为,肝藏血,主疏泻,肝血下注冲脉,司血海之定期蓄溢,参与月经周期、经期、及经量的调节,脾为后天之本气血生化之源,具有统摄血液,固摄子宫之权,只有肝的藏血与疏泻和脾的生化统摄正常,月经才能正常。肝喜条达,恶抑郁,肝与人的情志关系密切,只有肝气条达,气机通畅,通则不痛,腹痛痞满之症自然而除。中医理论又认为肾为冲任之本,气血之根,又与胞宫相连,所以治疗妇女胞宫胞脉病要肝肾同治。

补肾中药范文第3篇

肾阳虚一直是中医研究的重点,并不断采用先进技术对肾阳虚证动物模型及其药物影响进行研究。近 50 年对肾阳虚证的研究认为,肾阳虚与神经内分泌系统(NEIS)有关。文章就肾阳虚动物模型在下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺皮质、甲状腺、性腺和胸腺)轴不同环节、不同程度的功能紊乱,以及补肾中药对其影响的实验研究做了综述。

【关键词】 肾阳虚 动物模型 补肾中药 下丘脑 垂体

中医认为,肾为脏腑之本,十二经之根,先天之本在于肾。肾与命门本同一气,为人身阴阳消长之枢纽。因此,对肾阳虚证的研究一直是中医研究的重点。现代医学研究认为,肾阳虚证与神经内分泌免疫系统(NEIS)有关,肾阳虚证在下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺皮质、甲状腺、性腺和胸腺)轴不同环节、不同程度的功能紊乱,且主要发病环节在下丘脑(或更高级)的调节功能紊乱[1]。还认为,肾阳虚证也意味着一定程度的未老先衰。随着科技的发展,越来越多地采用先进技术对肾阳虚证动物模型及其药物影响进行研究。本文仅就补肾中药对肾阳虚证动物模型影响的实验研究概况作一综述[2]。

1 补肾中药对下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的影响

以促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)放射免疫分析法,观察温补肾阳代表药—附子的重要有效成分乌头碱对正常大鼠下丘脑CRH含量的影响。结果表明,正常大鼠在腹腔注射乌头碱不同剂量(1,3,10 μg)7 d后,下丘脑CRH含量呈剂量依赖性增高。免疫组织化学研究表明,乌头碱用药组下丘脑室旁核CRH阳性神经细胞及正中隆起CRH阳性神经纤维染色较对照组明显增多增深,且用药以中等剂量组最为明显。提示乌头碱可能直接兴奋下丘脑CRH的合成与分泌[1]。用分子生物学技术RT-PCR化学发光定量法研究肾阳虚大鼠,其HPA轴受抑,且下丘脑室旁核CRHmRNA的表达量明显比正常对照组减少[3]。以右归饮加减的补肾中药配方,采用RT-PCR半定量法检测下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调素CaM mRNA的表达。结果:肾阳虚下丘脑、肾上腺CaM mRNA 水平升高,垂体CaM mRNA 水平无显著变化,而右归饮可降低下丘脑CaMmRNA 水平,但对肾上腺影响不明显,提示降低CaMmRNA 是其药物作用机理[4]。又以液体闪烁仪测定γ-32P-ATP蛋白激酶的活性。结果:肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织中钙调素蛋白激酶II(CaMPK-II)显著升高。右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑和肾上腺组织升高的CaMPK-II活性有下调作用[5]。用32P-ATP掺入反应底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性,用放免法测定cAMP、cGMP含量,结果肾阳虚大鼠血浆中cAMP水平下降,cGMP升高,cAMP/cGMP比值降低,下丘脑组织中蛋白激酶PKA和PKC活性在胞液和胞膜中的活性较正常对照组明显降低。补肾药组血浆cAMP略升高,cGMP水平降低,cAMP/cGMP比值升高,且与模型组有统计学差异。补肾用药组下丘脑组织细胞中PKA活性升高,但与模型组无显著性差异,下丘脑组织胞液中PKC活性明显升高[6]。以免疫染色技术检测肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴c-Fos蛋白的表达。结果:肾阳虚大鼠下丘脑视交叉上核和肾上腺的c-Fos阳性细胞数显著升高,右归饮可抑制其升高,达到调整肾阳虚大鼠HPA轴的功能,抑制肾上腺细胞凋亡,从而改善肾阳虚症状[7]。利用扫描电镜分别观察下丘脑、垂体和肾上腺的超微结构,同时观察右归饮对其的影响。结果:肾阳虚大鼠模型组下丘脑正中隆起室管膜细胞界限不清,微绒毛分布改变,其顶端膨大呈球状,许多细胞部位出现孔洞,几乎未见分泌样颗粒结构,而补肾药组下丘脑正中隆起室管膜细胞排列整齐,细胞界限清楚,微绒毛粗细均匀,呈细长的绒线状,类似于正常组。由于下丘脑的许多神经分泌核团含有神经分泌颗粒的神经末梢终止于正中隆起,且正中隆起本身也有一些促垂体神经分泌细胞,因此正中隆起与下丘脑-垂体-肾上腺的分泌和调控密切相关[8]。电镜下模型组垂体ACTH细胞内质网扩张,线粒体空化,核形态正常,使ACTH合成分泌受抑,进而导致肾上腺结构损伤,肾上腺细胞核质比变大,细胞萎缩变小,脂滴显著变小,堆积在一些细胞中,而另一些细胞脂滴完全消失。表现为肾上腺束状带、网状带萎缩,糖皮质激素分泌受抑。补肾药组垂体ACTH细胞形态基本正常,细胞界限清楚,核形态完整,染色质均匀一致,线粒体、内质网与正常组类似。其肾上腺细胞超微结构的损伤略有改善,但不明显,基本类似于肾阳虚模型组。补肾中药能改善垂体超微结构的损伤,而调整垂体、肾上腺功能,改善肾阳虚症状[9]。用流式细胞仪和钙荧光探针研究细胞内钙信号在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用。测定血淋巴细胞内Ca2+([Ca2+]i)和血清钙。结果:肾阳虚大鼠下丘脑和血淋巴细胞[Ca2+]i及血清钙显著升高[10]。金匮肾气丸为补肾名方,以其不同浓度、不同时间来探讨肾阳虚大鼠垂体细胞增殖的影响。用3H-酪氨酸掺入检测垂体细胞转化,结果:金匮肾气丸高、中、低剂量组,在喂药后10,20,30 d,可见3H-酪氨酸标记的垂体细胞中合成蛋白质的量均有不同程度的增高,用药20~30 d后以中剂量组效果最为明显。提示金匮肾气丸对垂体细胞增殖有促进作用[11]。以RT-PCR检测垂体ACTH基因表达,结果以用药20~30 d后中、高剂量组ACTH mRNA表达上调最为明显[12]。研究蛇床子补肾壮阳作用,用蛇床子香豆素(TCR)和蛇床子素给肾阳虚大鼠用药,并测定其血浆皮质酮(B)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、肾素(PRA)、血管紧张素-II(AT-II)和醛固酮(ALD)浓度。结果:用药组大鼠血浆B和ACTH显著升高,但各组间PRA、AT-II和ALD浓度无显著性差异,提示TCR和蛇床子素具有保护和增强腺垂体-肾上腺皮质轴功能的作用[13]。

2 补肾中药对下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响

甲状腺功能生理范围内或病理性降低是肾阳虚的主要病理之一,以甲基硫氧嘧啶造甲状腺功能低下的肾阳虚模型,显示胃黏膜有较明显的萎缩病变,胃体黏膜固有层厚度、胃体腺腺底相对厚度明显减少,胃体腺中性红染色增强,幽门黏膜核分裂相频数显著减少等[14]。研究金匮肾气丸对以氢化考的松所致动物模型,分为模型组、氢考+补阳药组、氢考+补阴药组、氢考+金匮肾气丸组。结果:在给药7 d后,检测小鼠T3,T4水平,显示模型组T3,T4水平下降显著[15],全匮肾气丸组可显著提高小鼠T3,T4水平,其可调节甲状腺轴的内分泌功能,而补阴药和补阳药对甲状腺轴有影响,虽二者无差异,但较肾气丸组的影响弱。观察参附注射液对甲状腺机能减退症(甲减)肾阳虚小鼠血清甲状腺素的影响,用他巴唑制备甲减肾阳虚模型,用放射免疫法测定小鼠血清T3,T4和促甲状腺素(TSH)浓度,结果模型小鼠血清T3,T4浓度均降低,TSH浓度升高,造模后用药组T3,T4浓度明显升高,TSH浓度降低,提示参附液可显著改善肾阳虚证候[16]。而以醋酸考的松造模15,23,30 d,其血中T3、T4浓度和TSH浓度明显低于正常组[17]。以电镜观察肾阳虚动物模型及补肾益气药影响的垂体、甲状腺组织的超微结构。结果:肾阳虚大鼠垂体促甲状腺激素(TSH)细胞、甲状腺滤泡上皮细胞出现内质网、高尔基体扩张、线粒体空化、细胞变形、核形态改变等,而补肾益气中药可减轻上述超微结构损伤,但对甲状腺细胞超微结构损伤的保护作用甚微[18]。以仙戟汤给予甲状腺功能低下动物,并用放射免疫测定兔血清TSH,T3,T4水平,同时比较甲状腺素片与仙戟汤组的TSH,T3和T4。结果:仙戟汤组和甲状腺素片组TSH,T3和T4无显著性差异,均显著高于肾阳虚模型组[19]。

3 补肾中药对下丘脑-垂体-性腺轴的影响

以腺嘌呤造大鼠肾阳虚模型,观察补肾生精汤对肾阳虚睾丸功能损害的影响。于造模后,连续服药10 d,间接3 d再服,共服药30 d。结果:补肾药组大鼠肾阳虚症状明显改善,生育力、精子质量和睾丸生精功能均显著提高,睾丸组织学近似正常,血中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、和皮质醇(F)水平显著升高,而促卵泡生成素(FSH)不变。与模型组相比差异显著。提示补肾生精汤具有壮阳生精和调节内分泌功能的作用[20]。以羟基脲造模型,用检测血中微量元素铜、锌、铁、镍、锰、钴、锶和皮质醇(F)来观察右归丸灌服后血中微量元素,均显著升高,可使其微量元素由平衡-失衡-再平衡[21]。仍以同前的建模方式,右归丸灌服后检测血中微量元素、血浆生化等,其指标为尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、蛋白(TP)、总胆固醇(Tchol)和甘油三酯(TG)。结果:肾阳虚家兔全血微量元素含量均下降,TP和Tchol明显升高,BUN,Cr,LDH,TG等下降至正常范围。提示右归丸可对机体微量元素起整体平衡调节作用,也说明了血液微量元素是正确评价病证转归和药物疗效的重要指标[22]。观察以煅牡蛎、海龙、杜仲、巴戟天等7味中药组成的固延平散对肾阳虚小鼠的影响。结果:给药后可使肾阳虚小鼠体重、体温增加,游泳时间延长以及鼠睾丸重量增加[23]。观察鱼鳔补肾益精丸对肾阳虚小鼠的作用。结果可使大剂量皮质激素诱发的肾阳虚小鼠自主活动次数增加,游泳时间延长,体重、体温降低减少,使去势的大鼠前列腺、精囊、包皮腺明显增重,缩短阴茎勃起潜伏期,提高雄鼠的交配能力,改善神经性性功能障碍的性活动,有明显补肾壮阳作用[24]。观察以淫羊藿、蜈蚣等组成的健阳胶囊对肾阳虚小鼠和去势小鼠的影响。结果表明:其可增加鼠的自主活动次数、延长游泳时间、增加血中睾酮、增加其爬背次数和附性器官发育、增加体重和前列腺、包皮腺的重量、缩短阴茎勃起潜伏期[25]。探讨运动性低血睾酮与肾阳虚对骨骼肌α-actin基因表达的影响是否相同,以长时间大强度、较长时间游泳造成运动性低血睾酮,并以腺嘌呤造肾阳虚模型。结果:肾阳虚可通过抑制骨骼肌收缩蛋白基因表达影响大鼠骨骼肌功能,而运动性低血睾酮大鼠骨骼肌则未出现这种变化,故应慎用治疗肾阳虚中药来纠正运动性低血睾酮[26]。用电镜观察补肾益气中药对肾阳虚大鼠垂体-睾丸超微结构的影响。结果:以醋酸可的松造的肾阳虚模型垂体促性腺激素分泌细胞内质网、高尔基体严重扩张,线粒体固化,细胞固缩,睾丸曲细精管生精上皮细胞血睾屏障扩张,细胞中出现许多大小不等的空泡。补肾中药可改善垂体超微结构的损伤,但却不能改变睾丸超微结构的损伤[27]。观察以鹿茸、冬虫夏草、人参等药组成的的生精胶囊,以牛鞭、枸杞子、红参等组成的三宝双喜胶囊和由熟地黄、淫羊藿、金樱子、菟丝子等药组成的肾宝合剂对肾阳虚鼠的影响。结果:均能使幼龄雄鼠精子数增加、精子活力增强、性器官增重、活动度增加及雌鼠受孕率提高,胎仔数增多,有促进生育力的作用[28~30]。

4 补肾中药对下丘脑垂体肾上腺胸腺(HPAT)轴的影响

亦即对神经内分泌免疫(NEI)网络的影响。观察右归饮对皮质酮(CORT)造成的下丘脑垂体肾上腺胸腺轴抑制模型的调节作用。结果显示:模型大鼠HPAT轴从功能到形态出现抑制,血浆CORT及ACTH降低,脾细胞减少,淋巴细胞增殖反应减弱,室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)神经元及正中隆起CRF神经纤维、垂体前叶ACTH细胞等免疫组化染色明显变淡,数量变少,肾上腺、胸腺萎缩,以右归饮灌胃14d 后,垂体、肾上腺及胸腺重量显著增加,且使肾阳虚病理改变减轻,有效提高血浆CORT及ACTH含量,还对模型大鼠脾细胞、淋巴细胞有促增殖作用[31]。进一步又观察了右归饮对皮质酮所致肾阳虚动物模型细胞免疫及细胞因子的影响。结果表明:模型大鼠免疫功能受抑,淋巴细胞增殖反应减弱,自然杀伤细胞(NKCC)活性降低,白介素2(ILII)、γ干扰素(INFγ)含量减少,在用药14d 后,体内外试验均显示模型大鼠淋巴细胞增殖反应增强,诱生ILII和INFγ水平也明显提高[32,33]。另外,还有以健脾益气药四君子汤和活血药桃红四物汤来观察对皮质酮所致HPAT轴抑制模型的影响。结果表明:四君子汤灌胃能有效改善神经免疫功能,可使肾阳虚模型下丘脑单胺类递质增高,还可提高其血浆CORT及ACTH的含量,并增强NKCC活性和提高淋巴细胞诱生IL-II和INFγ的能力,但桃红四物汤则无此作用[34] 。进而又观察了补肾、健脾、活血三类复方对HPAT轴及CRF基因表达的影响。结果:唯有补肾药可通过上调下丘脑CRF mRNA表达来保护HPAT轴免受外源性皮质酮的抑制,健脾药则对免疫有直接的促进作用,活血药对HPAT轴无任何影响。此提示补肾药对肾阳虚证的主要调节点定位于下丘脑[35] 。探讨六味地黄汤抗糖皮质激素诱导胸腺萎缩的作用。结果表明:模型组小鼠胸腺重量减轻、皮质变薄,而六味地黄汤组小鼠胸腺重量高于模型组,胸腺皮质较厚,提示该药有抗糖皮质激素诱导胸腺萎缩的作用[36]。免疫衰老与T细胞凋亡关系的研究已深入到基因水平,为了探讨枸杞多糖对老年大鼠T细胞过度凋亡及相关基因表达的调节作用,用流式细胞技术和荧光实时定量PCR技术研究了老年大鼠和年轻大鼠T细胞凋亡百分率及抗凋亡和促凋亡基因(抗凋亡基因:Bcl-2,肿瘤坏死因子受体2(TNFR2);促凋亡基因:Fas,Fas的天然配体FasL,TNFR1和Bax)mRNA的表达情况,并研究了枸杞多糖对老年大鼠T细胞凋亡百分率及对上述促凋亡基因和抗凋亡基因mRNA表达的影响。结果:枸杞多糖能有效地降低老年大鼠T细胞的过度凋亡,且可下调促凋亡的TNFR1,并上调抗凋亡的Bcl2基因的mRNA表达[37] 。进而又研究用淫羊藿总黄酮(EF)延缓HPAT轴衰老的分子机制,用基因芯片技术分别检测EF组、右归饮组、桃红四物汤组、老年大鼠对照组及青年大鼠对照组下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏淋巴细胞的基因表达谱。结果表明:老年大鼠和青年大鼠相比,HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达下调;EF组HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达上调;右归饮及桃红四物汤组未见广泛的调节作用。提示老年大鼠HPAT轴与生长、发育、衰老相关的基因表达以衰退的表现为主;EF能上调神经递质受体的表达并通过NEI网络的下行通路激活神经内分泌和免疫系统;通过下调促凋亡、抗增殖基因,上调抗凋亡、促增殖基因的表达,重塑淋巴细胞基因表达平衡,延缓免疫衰老[38,39] 。用基因芯片研究老年大鼠与青年大鼠HPAT轴差异表达基因,结果表明:老年大鼠下丘脑多种神经递质或其受体如γ氨基丁酸A受体(GABA-AR)、α1肾上腺素受体(α1ER)、谷氨酸受体(GluR)、多巴胺转运蛋白表达下调,垂体多种促性腺激素包括FSH、LH和促性腺激素释放激素下调;生长激素和生长激素释放因子受体下调;脾淋巴细胞促凋亡基因Caspase1, Caspase3,Cpp32β等表达显著上调,抗凋亡基因cathepsin B、MTA1下调,抗增殖基因 Rb,BTG1表达上调,促增殖基因Jagged 1及cmyc1,cfos,Cyclin B1(细胞周期蛋白B1)等基因表达下调。提示:衰老时HPAT轴的衰退以下丘脑-垂体-性腺轴、下丘脑-垂体-生长激素轴、免疫系统受损最为明显。神经递质、生长激素、促性腺激素基因低表达及免疫细胞促凋亡基因高表达而抗凋亡基因低表达,促增殖基因低表达而抗增殖基因高表达是受损的分子机制[40]。

由NEI网络领衔的肾阳虚反映了统率全身的最大网络,这样就不至于把肾或命门局限在某个脏器或某个腺体,且宏观和微观取得统一,正常的人体结构是人类基因的一个有序的表达,疾病则是基因表达的失衡。对疾病的治疗都将从调控基因的功能着手。证是一种多基因参与的功能态,故其本身就是一种基因调控网络的表现,对此网络需以基因芯片为手段,研究该证基因表达谱,若以中药干预,既可由此纠正基因网络失衡,以“差异分析”找到基因表达差异谱,同时还可“以药测证”,观察与该证相关基因群之活动规律,并阐明证的本质[41]。由此东西方医学将汇合在DNA双螺旋体上[42] 。中医证候基因组研究,尤其是肾阳虚证基因组研究,引入生物信息学和信息融合,可将多源性、多层次、多性质、多方面的肾阳虚证治数据进行总结并前瞻设计信息的最佳组合,形成数学模型以揭示其规律[43]。 参考文献

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补肾中药范文第4篇

【关键词】补肾壮骨中药 骨质疏松 病理机制 药理机制 研究进展

对于骨质疏松症主要表现为骨量下降、骨微结构破损而导致脆性增强,以中老年患者为多见病。祖国传统中医认为,骨质疏松主要为肝肾虚衰导致筋骨失养,肾虚是诱发骨质疏症的关键病机,中药治疗上以补肾壮骨为主。现代药理学研究发现,对于补肾可有效调节内分泌,增强体液免疫力和细部活力,促进骨密度增加,改善和修复骨微结构,从而得到防治骨质疏松的治疗目标。

一、补肾壮骨中药对骨细胞增殖分化的影响

对于人体骨代谢研究表现成骨细胞形成新骨、破骨细胞吸收旧骨的过程。正常的骨代谢在骨形成与骨吸收中动态平衡,如果骨形成大于骨吸收则有助于增进骨量;反之则减少骨量,严重失调则导致骨质疏松。补肾壮骨类中药能促进碱性磷酸酶的分泌,对于碱性磷酸酶主要是成骨细胞分化特异性标志,在骨形成过程中碱性磷酸酶参与骨的矿化。冯淑华研究发现,巴戟天有助于促进骨细胞分泌碱性磷酸酶;刘亦恒发现,淫羊藿总黄酮有助于提升碱性磷酸酶的活性,促进骨细胞增殖和分化;梁冬波发现,熟地黄在补肾活血上能够促进成骨细胞的增殖,改善骨组织微循环。补肾壮骨类中药能够上调成骨相关基因表达,凌昆研究发现,巴戟天药物血清有助于改善骨细胞表达转化生长因子,促进骨组织生长;李三华发现杜仲总黄酮具有直接促进成骨细胞的骨钙素表达;另据文献研究,川续断皂苷可以促进蛋白形成,激活P38和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的通路,有助于促进骨细胞增殖分化;高建林发现阿魏酸具有促进骨细胞增殖、分化的功能,其作用机制与信号通路有关;还有研究发现肉苁蓉的提取物能够促进,以及骨桥蛋白的表达,进而降低血清BGP水平,来促进骨髓转化。在抑制破骨细胞活性上,Wu等人发现巴戟天类中药能够抑制TRAP的活性,可以有效预防骨折发生;程孟春发现何首乌中蒽醌类成分对破骨细胞增殖有抑制作用;还有报道研究发现淫羊藿对MAPKs/NF-kB信号通路有抑制作用,进而影响骨吸收功能;还有甘草中的异甘草素也对降低骨细胞中的肿瘤坏死因子具有明显效果。

二、补肾壮骨中药对雌激素水平及受体的调节作用

雌激素作为女性的重要生殖激素,对骨代谢功能起到重要调节作用。有研究发现,通过对抗骨质疏松中药有效成分的研究,可影响雌激素水平,而雌激素可以促进骨细胞增殖,诱导破骨细胞凋亡。甲状旁腺激素可以促进骨吸收,雌激素有拮抗PTH并抑制IL-1和IL-6的分泌功能,而雌激素减少,对IL-1和IL-6的抑制作用消失。杜仲作为传统中药,可以调节血清雌激素水平,来抑制骨质疏松症的发生;淫羊藿苷作为植物雌激素,可以激活成骨细胞增殖、分化,延缓骨细胞凋亡。武密山研究发现淫羊藿苷可以调节下丘脑不同核团雌激素受体的表达,还能促进KGN细胞芳香化酶的转化,有助于增进雌激素;另外,对于当归也可以增加雌激素合成,减少血清卵泡刺激素、多巴胺、下丘脑去甲肾上腺素等神经递质的释放,提高超氧化物歧化酶的活性。

三、补肾壮骨中药对MSCs成骨及成脂分化的调节影响

从抗骨质疏松中药的有效成分分析来看,骨髓间充质干细胞具有多向分化功能,而有效成分在成骨分化上能够抑制酯化分化。MSCs成骨与成脂分化对于骨质疏松具有重要影响,MSCs在进行自我复制或多向分化中,可以分化成骨细胞、神经元细胞、脂肪细胞、肝细胞等,骨髓间充质干细胞具有此消彼长的关系,而抗骨质疏松中药的有效成分能够减少骨髓中脂肪组织的增多,从而促进成骨细胞的形成。张贤发现,杜仲醇提取物可以促进BMSCs的转化,而BMSCs有助于向成骨细胞分化转化而抑制成脂分化能力,对于改善骨质疏松症具有疗效;冯展波发现杜仲可以调节和成纤维生长因子的表达,对骨质疏松具有明显改善。

四、补肾壮骨中药有效成分对OPG/RANK/RANKL系统的影响

OPG/RANK/RANKL是影响骨重建的重要系统之一,特别是对OB和OC之间的平衡调节,当OB接受刺激因子作用后分泌RANKL,RANKL与OC前体的RANK结合,促进OC前体分化。而OPG作为参与竞争的因子之一,能够抑制OC的分化。徐祥赫发现,杜仲在调节MC3T3-E1增殖分化中,能够对OPG/RANKL的比值进行上调,抑制破骨细胞分化;肉苁蓉单体成分松果菊苷也能够上调OPG/RANKL比值;宋敏发现淫羊藿总黄酮代谢产物也可以上调OPGmRNA并抑制OPGLmRNA的表达;另外,对于黄芪三仙汤、枸杞子、巴戟天、狗脊等提取物也能够影响OPG/RANKL系统,来改善骨质疏松。

五、补肾壮骨中药有效成分对钙磷及氧化应激的影响

对于钙作为人体重要元素,骨质疏松患者的钙水平往往较低,骨吸收超过骨形成。对于低钙、高磷可以从刺激甲状旁腺活性上来增强骨吸收,诱发骨质疏松。通过调整钙磷代谢,可以对肠粘膜加大钙吸收。纳米钙补肾中药可以调控MARK通路中ERK的信号转导,增进钙吸收;朱飞鹏发现,肾脏对骨组织的影响主要是由肾脏羟化酶的活性及对钙磷代谢的调控作用,何首乌等中药能够提高羟化酶活性,改善钙磷代谢。总之,通过对补肾壮骨类中药有效成分的分析,并从药理上来探讨其在改善骨质疏松的调节作用,由于中药具有多环节、多组分、多靶点综合作用,在临床治疗骨质疏松症中具有较广的应用前景。

参考文献:

补肾中药范文第5篇

【关键词】胶体金法;补肾壮阳类中成药;PDE5型抑制剂

【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)05-0426-02

Analysis of PDE5 inhibitor added in traditional Chinese medicinal tonics for by colloidal gold

ZHOU TIAN xiang

(Guangxi Yulin Institute for Food and Drug Control, Yulin537000,China)

【Abstract】Objective:To apply colloidal gold to check PDE5 inhibitor added in traditional chinese medicinal tonics. Method: To traditional chinese medicinal tonics by colloidal gold and liquid chromatography - mass spectrometry confirmed, will be the statutory test results. Results: With colloidal gold of laboratory tests to determine the samples for qualified and unqualified to conduct screening, accuracy rate of 90%. Concousion: Colloidal gold has established is simple and easy to operate and rapid screening of PDE5 inhibitor added in traditional chinese medicinal tonics for Food and drug administration.

【Key words】colloidal gold; traditional Chinese medicinal tonics; PDE5 inhibitor

中成药是我国传统医药文化的结晶,历来以其疗效好,副作用小而深受人民群众所推崇。近年来,一些不法分子在经济利益的驱动下,为了让中成药治疗效果更明显,非法在中成药中添加与其功能主治相适应的化学药品。中成药中非法添加化学成分后,由于患者在不知情的情况下服用,对化学药品的用法用量无法控制等原因,容易造成药物滥用带来不良反应,甚至造成伤害事件;也影响医生正确指导患者用药。国家明令禁止在中成药和保健食品中添加化学成分,但根据日常监督抽验发现,目前在补肾壮阳类中成药中非法添加治疗男障碍的PDE5型抑制剂的现象仍较严重,严重影响了人民群众的用药安全。为了有效打击上述不法行为,我们利用胶体金法对补肾壮阳类中成药中非法添加PDE5型抑制剂进行快速筛查,经过实验数据验证,证实该方法稳定可行,简单易操作,准确率高,适用于监管部门对补肾壮阳类中成药或保健品中是否添加PDE5型抑制剂的快速筛查。[1-3]

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters2695分离单元、2998PDA光电二极管阵列检测器;Waters Quattro MicroTM API 三重四极杆质谱仪(美国Waters公司);METTLER TOLEDO XS205电子分析天平;MILLIPORE SYNERGY超纯水仪

1.2 试药 枸橼酸西地那非对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:无,供检查、含量测定用);豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非盐酸盐、伪他达那非、他达那非、氨基他达拉非等对照品均购自振翔公司。西地那非检测试剂盒(胶体金法)购自南通市伊士生物技术有限责任公司。乙腈、甲醇为色谱纯;乙酸铵为分析纯;水为高纯水。补肾壮阳类中成药:龟鹿补肾丸、参桂鹿茸丸、鹿茸壮肾丸、强阳补肾丸、参茸鞭丸、虫草肾阳丸、参茸鞭丸、灵芝参茸丸、藏王肾宝、养血补肾丸、海马多鞭丸等20批(本所监督抽样留样)。

2 试验原理

2.1 高效液相色谱-质谱联用法[4]

2.1.1 色谱条件

色谱柱: Waters XBridge C18 ,3.5μm,2.1×150mm;柱温:35℃,流速:0.25mL.min-1,;进样量:10mL;流动相:乙腈(A)- 0.01mol.L-1乙酸铵水溶液(0.1%甲酸)(B),线性梯度洗脱,条件见表1。

质谱参数:电喷雾离子化,正离子化模式,多反应监测(MRM),毛细管电压3.5kv,锥孔电压50V,源温度120℃,脱溶剂气温度350℃,脱溶剂气流速700 L. hr-1,锥孔气流速:100 L. hr-1,其他条件见表2。

2.1.2溶液的制备

对照品溶液的制备:取枸橼酸西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非盐酸盐、伪伐地那非、他达那非、氨基他达那非对照品各10mg,精密称定,各置100mL量瓶中,加入乙腈适量,超声处理10分钟,放冷至室温,用乙腈稀释至刻度,作为对照品储备液。分别精密量取0.5ml上述11种对照品储备液,置100ml 容量瓶,用乙腈稀释至刻度,作为混合对照品储备液。精密量取混合对照品储备液0.01 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.50 mL、1.00 mL、5.00 mL分别置10 mL量瓶中,用初始流动相稀释至刻度,制成系列标准曲线溶液。

供试品溶液的制备:取一次服用量的样品,置100 mL具塞三角瓶中,精密加入乙腈100 mL,称定重量,超声30 min,放冷,称定重量,用乙腈补足减失的重量,滤过,续滤液作为贮备液,精密量取贮备液,以初始流动相稀释10~100倍,摇匀,用0.22mm滤膜滤过,取续滤液,即得。

2.1.3 测定结果

分别取上述对照品与供试品溶液10mL,进样测定。记录质谱图,见图1。以各组分的质质量量浓度(ng. mL-1)为横坐标,以峰面积为纵坐标进行回归,得各组分的标准曲线方程,见表3。

图1 混合对照品质谱图

1-那红地那非;2--红地那非;3-伐地那非; 4-羟基豪莫西地那非、西地那非; 5-豪莫西地那非;6-氨基他达拉非;7-他达拉非;8-硫代艾地那非;9-伪伐地那非;10-那莫西地那非.

Fig 1 MS chromatogram for mixture of reference standdards figure

1- Noracetildenafil;2-- Acetildenafil;3- Vardenafil; 4- Hydroxyhomos ildenafil、Sildenafil ; 5- Homosildenafil;6-Aminotadalafil;7-Tadalafil; 8- Thioaildenafil;9- Pseudovardenafil;10- Norneosildenafil .

2.2胶体金法的检验原理 采用特异性的抗体抗原反应及胶体金免疫层析

技术,通过单克隆抗体竞争结合西地那非偶联物和保健品中可能有的西地那非的原理。试剂盒含有被事先固定于膜上测试区(T)的西地那非偶联物和被胶体金标记的抗西地那非单克隆抗体。检测时,样品滴入试剂盒孔内,随之在毛细效应下向上层析。如样品中西地那非浓度低于10μg/ mL时,胶体金抗体不能与西地那非全部结合。胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的西地那非偶联物结合,在测试区(T)内会出现一条紫红色条带。如果西地那非在样品中浓度高于10μg/ mL时,胶体金抗体与西地那非全部结合,从而在测试区(T)内因为竞争反应不会与西地那非偶联物结合而不出现紫红色条带。

2.2.1 样品的处理 根据药品或保健品的剂型不同处理方法亦不相同:对于胶囊可直接将内容物倒入离心管中,加入1 mL的稀释液,充分振荡溶解后,用小吸管取一滴滴加到另一只离心管中,再加入1 mL稀释液混合均匀,此稀释液后的样品可用于检测。对于片剂或丸剂则应先研成细粉,再按照上述方法进行处理后即可用于检测。

2.2.2 检测方法 吸取经处理的样品稀释液垂直滴加2滴于检测板的加样孔(S)内,5~10分钟内观察并记录实验结果。

2.2.3 结果判定 阴性:试纸条在检测线和质控对照处出现两条紫红色条带。阴性结果表明,标本中未检测出西地那非或其同系物。阳性:试纸条只在质控对照线出现一条紫红色条带。阳性结果表明,标本中检测出西地那非或其同系物。(见图2)

a b c d e

图2 结果判定图

a. 质控阳性图;b. c. d.样品阳性图;e. 质控阴性图

3 讨论

3.1 无论西地那非及其同系物是否存在于待检样品中,一条紫红色条带都会出现在质控区(C)内。质控区(C)内所显现的紫红色条带是判定是否有足够样品,层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂的内控标准。

3.2 西地那非检测试剂盒(胶体金法)是一种定性检测西地那非或其同系物,实验环境应避风、避免在过高温度、过高湿度或过于干燥的环境中进行实验。质控对照线未出现紫红色条带,表明不正确操作或试剂盒失效。

3.3 用胶体金法对实验室判定为不合格(未检出西地那非)与不合格(检出西地那非)的样品进行筛查,准确率达到90%。胶体金法在日常监督的实际应用中,应与现场检查结合起来,对可疑的样品进行现场分析,则应用效果会更好,为打击在补肾壮阳类中成药中非法添加PDE5型抑制剂的行为提供一种快速的现场检测方法。

参考文献:

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[4] 国家食品药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件(批准件编号:2009030)

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